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关键词：
甜荞,苦荞,高效液相色谱(HPLC),酚酸,黄酮
发表时间：
2012-02-27 11:03:39
摘 要：采用D315 弱碱性阴离子交换树脂和Sephadex G-25 凝胶柱层析，从白背三七叶粗多糖中分离纯化得到中性多糖GDPs-1、GDPs-2 及酸性多糖GDPs-3 3 个多糖组分。经高效凝胶色谱测定，重均分子质量分别为：1.06 × 104、4.17 × 103D 和3.74 × 103D；纯度分别为94.08%、92.3% 和99.8%。红外光谱证明3 种多糖均含有多糖类特征吸收峰，初步推测GDPs-1 中α和β构型并存，GDPs-2 和GDPs-3 为α构型；核磁共振结果进一步证实3 种多糖中均只含有α构型。
白背三七(Gynura davaricata(L.) DC.)，菊科菊三七属植物，又名白子菜、富贵菜、鸡菜等。分布于台湾至华南、西南一带，喜生长于村旁、山坡等地[ 1 ] 。其根、茎、叶均可入药，具有清热解毒、止血、凉血、降血糖等功效[2]。民间以白背三七地上部分作为食药两用，广泛用于治疗高血压病、高脂血症及糖尿病等，故亦有“神仙草”之称。2 0 世纪9 0年代中后期逐渐从自然野生发展成为人工栽培[3]，是一种优良的药食两用植物。
多糖是构成生命的四大基本物质之一，具有储存能量、调节免疫力、抗肿瘤、降血糖等生物学活性，已引起越来越多的关注[ 4 - 6 ] 。白背三七多糖( G y n u r adavaricata polysaccharides，GDPs)为该植物中主要活性成分之一，动物实验研究表明白背三七多糖具有降血糖功效，并能提高小鼠耐缺氧能力[7-10]，因此研究白背三七多糖成分，开发降血糖新药、功能性食品以及办公室等缺氧人群的保健品等具有广阔前景。但目前对白背三七多糖的分离纯化研究报道较少[7]，还没有对白背三七多糖的组成和结构特征等方面的报道。
植物多糖的分离纯化多采用离子交换和凝胶柱层析相结合的方法。纤维素离子交换树脂是一种常用的柱层析介质[11-12]，通过改变洗脱剂的离子强度达到分离中性多糖和酸性多糖的目的。但其价格较昂贵，增加了分离的成本。D315 树脂是由具有大孔结构的丙烯酸甲酯共聚交联高分子聚合物，通过多乙烯多胺进行胺解得到的多胺基弱碱性离子交换树脂，在水中能离解出OH－而呈
弱碱性，树脂的正电基团能与溶液中的阴离子吸附结合，从而产生阴离子交换作用。多糖除含有中性多糖外，还含有一定量的酸性多糖；酸性多糖的糖醛酸部分在弱碱性条件下带负电，被吸附于阴离子交换树脂上，而中性多糖不被吸附，据此将酸性多糖和中性多糖进行分离。王元凤等[13]曾采用D315 树脂对茶多糖中的中性糖和酸性糖进行了分离；D315 树脂价格便宜，分离成
本低，适用于规模化生产。
本实验着重对白背三七多糖的分离纯化方法进行研究。白背三七鲜叶汁喷雾干燥粉，经热水提取、脱蛋白、脱色、乙醇分级沉淀得到粗多糖；采用D315 离子交换树脂和SephadexG-25 凝胶柱层析，分离纯化得到中性多糖GDPs-1、GDPs-2 及酸性多糖GDPs-3 3 个多糖组分；经高效凝胶色谱(GPC)确定了重均分子质量，红外光谱(IR)及核磁共振氢谱(1H-NMR)证实为多糖类成分并确
定了其构型，为进一步研究白背三七多糖的结构特征和生物活性提供参考。
多糖是构成生命的四大基本物质之一，具有储存能量、调节免疫力、抗肿瘤、降血糖等生物学活性，已引起越来越多的关注[ 4 - 6 ] 。白背三七多糖( G y n u r adavaricata polysaccharides，GDPs)为该植物中主要活性成分之一，动物实验研究表明白背三七多糖具有降血糖功效，并能提高小鼠耐缺氧能力[7-10]，因此研究白背三七多糖成分，开发降血糖新药、功能性食品以及办公室等缺氧人群的保健品等具有广阔前景。但目前对白背三七多糖的分离纯化研究报道较少[7]，还没有对白背三七多糖的组成和结构特征等方面的报道。
植物多糖的分离纯化多采用离子交换和凝胶柱层析相结合的方法。纤维素离子交换树脂是一种常用的柱层析介质[11-12]，通过改变洗脱剂的离子强度达到分离中性多糖和酸性多糖的目的。但其价格较昂贵，增加了分离的成本。D315 树脂是由具有大孔结构的丙烯酸甲酯共聚交联高分子聚合物，通过多乙烯多胺进行胺解得到的多胺基弱碱性离子交换树脂，在水中能离解出OH－而呈
弱碱性，树脂的正电基团能与溶液中的阴离子吸附结合，从而产生阴离子交换作用。多糖除含有中性多糖外，还含有一定量的酸性多糖；酸性多糖的糖醛酸部分在弱碱性条件下带负电，被吸附于阴离子交换树脂上，而中性多糖不被吸附，据此将酸性多糖和中性多糖进行分离。王元凤等[13]曾采用D315 树脂对茶多糖中的中性糖和酸性糖进行了分离；D315 树脂价格便宜，分离成
本低，适用于规模化生产。
本实验着重对白背三七多糖的分离纯化方法进行研究。白背三七鲜叶汁喷雾干燥粉，经热水提取、脱蛋白、脱色、乙醇分级沉淀得到粗多糖；采用D315 离子交换树脂和SephadexG-25 凝胶柱层析，分离纯化得到中性多糖GDPs-1、GDPs-2 及酸性多糖GDPs-3 3 个多糖组分；经高效凝胶色谱(GPC)确定了重均分子质量，红外光谱(IR)及核磁共振氢谱(1H-NMR)证实为多糖类成分并确
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