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关键词：
3-羟基丙烯腈,合成,生物活性
发表时间：
2012-06-12 17:55:18
直接竞争酶联免疫吸附分析法测定甘蔗中的克百威残留
钱荣轩 | -> | 820| 1| 0.544598MB |直接竞争酶联免疫吸附分析,甘蔗,克百威,残留量,高效液相色谱
摘 要: 采用包被抗体直接竞争酶联免疫吸附分析( EL ISA )法测定了甘蔗中的克百威残留量。在
优化条件下, 对克百威标样检测的线性范围为0. 000 1~ 1 mg /L, 抑制中浓度( IC50 ) = 3. 09 Lg /L,5次重复测定的相对标准偏差(RSD )为9. 3% , IC20值为0. 085 Lg /L。甘蔗中分别添加克百威标样1, 0. 1, 0. 01m g /kg, 直接竞争EL ISA 法测定的回收率分别为86. 3%~ 99. 1%, 89. 0% ~ 101% 和70. 7%~ 90. 6%, RSD ( n = 5)分别为5. 4%, 5. 2% 和10. 7%。ELISA 法对甘蔗中克百威残留的最小检出量为6. 3 @ 10- 11 g, 定量限可达1. 26 Lg /kg。而同样前处理条件下高效液相色谱-紫外检测器( HPLC-UV )法对克百威的最小检出量为5 @ 10- 8 g, 检测甘蔗中克百威残留的定量限仅为2. 5m g /kg。
优化条件下, 对克百威标样检测的线性范围为0. 000 1~ 1 mg /L, 抑制中浓度( IC50 ) = 3. 09 Lg /L,5次重复测定的相对标准偏差(RSD )为9. 3% , IC20值为0. 085 Lg /L。甘蔗中分别添加克百威标样1, 0. 1, 0. 01m g /kg, 直接竞争EL ISA 法测定的回收率分别为86. 3%~ 99. 1%, 89. 0% ~ 101% 和70. 7%~ 90. 6%, RSD ( n = 5)分别为5. 4%, 5. 2% 和10. 7%。ELISA 法对甘蔗中克百威残留的最小检出量为6. 3 @ 10- 11 g, 定量限可达1. 26 Lg /kg。而同样前处理条件下高效液相色谱-紫外检测器( HPLC-UV )法对克百威的最小检出量为5 @ 10- 8 g, 检测甘蔗中克百威残留的定量限仅为2. 5m g /kg。
克百威( carbo furan ), 化学名称2, 3-二氢-2, 2-二甲基-7-苯并呋喃-N-甲基氨基甲酸酯, 是一种高效广谱的氨基甲酸酯类内吸性杀虫、杀线虫剂, 广泛用于棉花、水稻、甘蔗、花生、大豆、烟草等作物害虫的防治[ 1] 。克百威在土壤中不易降解, 易通过径流和渗透造成地表和地下水污染。虽然我国农药残留标准中规定克百威在蔬菜和水果中为不得检出[ 2 ] , 但违规使用克百威的现象仍较为普遍, 因误食被克百威污染的蔬菜等食物而引起中毒的事件时有发生。
目前克百威的残留检测主要有气相色谱法(GC ) [ 3–4] 、高效液相色谱法( HPLC ) [ 5–7] 、气-质联用(GC-M S ) [ 8–9] 和液-质联用法( HPLC-M S ) [ 10–11 ] 。采用这些分析方法需要昂贵的仪器和专门技术人员, 样品前处理过程复杂且花费高、费时长, 难以满足大量样品和现场样品快速检测的需要。酶联免疫吸附分析法( ELISA ) 具有简便快速、特异灵敏、样品容量大、分析成本低的特点, 可以简化甚至省去样品净化步骤, 在大量样本和现场样本快速筛选监测中显示出独特优势。本文在现有克百威免疫分析技术研究的基础上[ 12–14] , 采用包被抗体、酶标半抗原-克百威直接竞争模式, 优化相关条件, 在减少抗体及酶标半抗原用量的同时, 提高检测灵敏度, 缩短分析时间, 首次建立了甘蔗中残留克百威的高灵敏度、高特异性快速检测EL ISA 法, 同时采用高效液相色谱带紫外检测器(HPLC-UVD )法进行对比分析。
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