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关键词：
白酒,勾调,体会
发表时间：
2012-11-09 09:10:09
摘要: 以酿酒酵母为菌种, 采用PDA 基本培养基,研究在不同的培养温度、时间和初始pH 值条件下线粒体ATP 合酶活性对谷胱甘肽( GSH) 合成的影响。结果表明: ①初始pH6.0 时, 30 ℃培养24 h, 线粒体ATP 合酶活性和GSH 含量均达到了最高, 分别为15.73 μmol/mg·protein·h 和1.27 μmol/g·FW; ②在最适温度30 ℃、pH6.0 条件下培养, 线粒体ATP 合酶活性在培养48 h 达到最大, GSH 含量在培养60 h 达到最大; ③初始pH 6.0 时, 在24 ℃条件下, 线粒体ATP 合酶活性保持稳定, GSH 含量随时间增加而增加。在34 ℃时, 线粒体ATP 合酶活性在24 h 最大, GSH 含量在36 h 达到最高; ④初始pH 6.0 时线粒体ATP 合酶活性达到最大,GSH 含量最高。实验结果表明, 酵母线粒体ATP 合酶在不同培养条件下活性是不同的, 同时也说明了ATP 合酶活性与GSH的合成有密切的关系。
谷胱甘肽(glutathione, GSH) 是一种广泛存在于动物、植物及微生物细胞内的含有巯基的三肽化合物, 它不但能降低生物体内的还原态, 防止氧化伤害, 同时也能够对细胞内和细胞外的毒性起到解毒的作用[1]。还原型GSH 作为重要的抗氧化物质, 在生物体内具有极其重要的生理功能[2, 3]。Aline 的研究表明, 缺失GSH 的酵母突变体菌株, 在脱水的胁迫条件下, 更易受氧化胁迫,MDA 含量大量增加[4]。在临床上, 谷胱甘肽是一种治疗肝脏疾病、肿瘤、中毒、白内障、衰老及变态反应的重要生化药物[5]。近年来,随着谷胱甘肽更多的生理功能被发现, 它在食品添加剂、临床医学和运动营养学上倍受关注,需求量不断增加。
GSH 由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸经肽键缩合而成。L- 谷氨酸和L- 半胱氨酸在γ- 谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ- GCS: EC6.3.2.2)的催化下生成γ- 谷氨酰半胱氨酸(γ- GC), 随后在谷胱甘肽合成酶(GC: EC6.3.2.3)的催化下, γ- GC 与甘氨酸缩合形成GSH。两个合成步骤都需要ATP 的参与[6]。在酵母细胞中, ATP 合成是在线粒体内由ATP 合酶催化而成。
目前GSH 商品主要来自酵母生物合成。前人在利用酵母发酵法生产GSH 和提高GSH 含量上作了很多的研究, 主要是酵母GSH 高产突变育种[7, 8], 培养条件优化[8]和利用分子生物学技术[9]等研究GSH 的合成及生理作用[10～12]等。但在酵母线粒体ATP 合酶活性对GSH 合成的影响方面报道极少。本研究设置不同的培养条件对酵母线粒体ATP 合酶活性和谷胱甘肽含量的关系进行
探讨, 旨在弄清酵母谷胱甘肽合成的生理机制, 为提高酵母发酵法生产GSH 的产量提供理论指导。
目前GSH 商品主要来自酵母生物合成。前人在利用酵母发酵法生产GSH 和提高GSH 含量上作了很多的研究, 主要是酵母GSH 高产突变育种[7, 8], 培养条件优化[8]和利用分子生物学技术[9]等研究GSH 的合成及生理作用[10～12]等。但在酵母线粒体ATP 合酶活性对GSH 合成的影响方面报道极少。本研究设置不同的培养条件对酵母线粒体ATP 合酶活性和谷胱甘肽含量的关系进行
探讨, 旨在弄清酵母谷胱甘肽合成的生理机制, 为提高酵母发酵法生产GSH 的产量提供理论指导。
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