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凝胶色谱分离高梁外种皮中低聚体原花青素

杨小文 | -> | 996| 3| 0.450561MB |高梁外种皮,原花青素,凝胶色谱,高效液相色谱,分离鉴定

杨小文 杨小文 | 文档量 |浏览量18724

摘 要:建立高粱原花青素分离及其组成分析的方法。采用乙醇溶液提取高粱外种皮中原花青素,通过ADS-17 大孔树脂初步纯化,得到高粱原花青素,进而用Toyopearl HW-40 凝胶色谱对高粱原花青素分离,并用紫外光谱分析及高效液相色谱- 二极管阵列检测法初步分析鉴定。结果表明:Toyopearl HW-40 凝胶色谱分离得到A、B、C、D、E 、F 六个部分。经过紫外光谱分析初步鉴定出级分A 、C 、D 、E 、F 均为原花青素,B 为黄酮;经高效液相色谱- 二极管阵列检测法分析可知,级分C 和D 分别为原花青素的二聚体B1 和单体儿茶素,级分F 为原花青素的低聚体。建立的高粱原花青素的分离分析方法效果良好。
    花青素(procyanidins,PC)是植物多酚中以儿茶素(和/ 或)表儿茶素为结构单元聚合而成的黄烷醇类聚合物,具有极强的清除自由基和抗氧化能力以及较强的药理活性,如抗癌、抗炎、抗诱变等[ 1 ]。已有研究证明原花青素广泛存在于水果、蔬菜、谷物和中草药中[ 2]。我国高粱的栽培面积居世界第5 位,产量居世界第3 位,分布在全国21 个省、市、自治区。近年来已有研究发现,高粱外种皮中原花青素的含量超过5%,且不同产地和品种高粱中原花青素含量和组成有较大差异。高粱作为食用和饲用时都要经过碾白去掉外种皮(糠),而碾白时出糠率为20% 左右,这一富含原花青素资源未被有效利用。
    目前原花青素的纯化应用最多的是大孔吸附树脂,大孔吸附树脂属于功能高分子材料,是近30 余年来发展起来的一类有机高聚物吸附剂,文献报道常用的大孔树脂有AB-8[3-4]、聚酰胺[5-6]、Amberlite XAD-16[7]、ADS-17[8-9]等,进一步分离通常采用Sephadex LH-20[10]和Toyopearl- HW-40[11]。高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)也是目前比较常用的原花青素分离和分析的方法,它通常与质谱联用来分析原花青素,Jan[12]、Falleh[13]和Maarit[14]等采用正相和反相高效液相以及与质谱联用等技术分离鉴定了天然产物中的原花青素。
    本研究采用乙醇溶液进行提取,通过ADS-17 大孔树脂初步纯化得高粱原花青素(sorghum procyanidins,SPC),通过Toyopearl HW-40 凝胶色谱进行分离,结合紫外光谱分析(ultraviolet spectrophotometry)、HPLC进行分离鉴定,为研究高粱原花青素的组成及其分离提
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