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关键词：
示差折光高效液相色谱法,复方胃蛋白酶颗粒,葡萄糖,蔗糖,麦芽糖
发表时间：
2012-02-27 15:23:25
示差折光高效液相色谱法测定复方胃蛋白酶颗粒中的糖
吕婷 | -> | 1021| 7| 0.180935MB |示差折光高效液相色谱法,复方胃蛋白酶颗粒,葡萄糖,蔗糖,麦芽糖
摘 要：建立用示差折光高效液相色谱法测定复方胃蛋白酶颗粒中葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量的方法。选用色谱柱为Sugar-D，流动相为乙腈- 水(78:22，V/V)，流速为1.0mL/min，在室温条件下进样分析。结果表明：在该条件下，葡萄糖、蔗糖、麦芽糖能够较好分离，在0.50～10.00mg/mL 范围内线性关系良好；葡萄糖回收率为94.3%～103.7%，蔗糖回收率为101.4%～105.1%；经不确定度评价，合成不确定度为1.92%，扩展不确定度为4 . 1%。该方法简单、准确、稳定、可靠，可用于复方胃蛋白酶颗粒中葡萄糖、蔗糖的含量测定。
糖是人体必需的营养要素，吃少量的糖对人体有益。但每个人的糖耐量有差异，进食过多的糖对身体不利。糖作为药剂的矫味剂，可以掩盖苦味，深受患者欢迎。因此，葡萄糖、蔗糖、麦芽糖等在一些生化制品、药剂中广泛应用[1]。这些糖的存在还可以起到稳定剂的作用。如今，还没有检测生化制品中葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量的国家标准方法。所以，建立一种检测生化制品中糖含量的测定方法十分必要。
糖含量测定常用的方法有比色法[2 -3 ]、高效液相色谱- 蒸发光散射法(high performance liquid chromatography-evaporative light scattering detector，HPLC-ELSD)[4-5]、
高效液相色谱- 示差折光检测法(HPLC-refractive index，HPLC-RI)[6-8]等。比色法是一种还原糖的测定方法，常采用费林试剂。所有单糖和大多数二糖是还原糖，但蔗糖除外。而蔗糖在生化制品中添加较为普遍，所以采用比色法有局限性[ 9 ]。因此，根据糖的性质，采用分离分析的液相色谱法能弥补比色法的不足[10]。ELSD 最大的优点在于能检测不含发色团的化合物，如碳水化合物、脂类、氨基酸、脂肪酸和聚合物等[ 1 1 - 1 5 ]，还具有对温度变化不敏感、检测灵敏度高、基线稳定、适合梯度洗脱等特点。但在糖的分析上，常采用的是氨基柱。在有水的流动相中，氨基要流失。所以在ELSD的色谱图中，常有较大的针状的噪声产生，且影响目标物质的出峰。另外，检测器的条件需要优化，操作相对繁琐。示差折光检测器也是通用型检测器[16-17]。虽然检测灵敏度相对较低，但氨基的流失不影响仪器的噪声和目标物质，且操作相对简单。本实验采用高效液相色谱- 示差折光检测法，建立一种同步检测胃蛋白酶制剂中葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量的分析方法，方法准确、简便、快速，具有较强的实用性。
糖含量测定常用的方法有比色法[2 -3 ]、高效液相色谱- 蒸发光散射法(high performance liquid chromatography-evaporative light scattering detector，HPLC-ELSD)[4-5]、
高效液相色谱- 示差折光检测法(HPLC-refractive index，HPLC-RI)[6-8]等。比色法是一种还原糖的测定方法，常采用费林试剂。所有单糖和大多数二糖是还原糖，但蔗糖除外。而蔗糖在生化制品中添加较为普遍，所以采用比色法有局限性[ 9 ]。因此，根据糖的性质，采用分离分析的液相色谱法能弥补比色法的不足[10]。ELSD 最大的优点在于能检测不含发色团的化合物，如碳水化合物、脂类、氨基酸、脂肪酸和聚合物等[ 1 1 - 1 5 ]，还具有对温度变化不敏感、检测灵敏度高、基线稳定、适合梯度洗脱等特点。但在糖的分析上，常采用的是氨基柱。在有水的流动相中，氨基要流失。所以在ELSD的色谱图中，常有较大的针状的噪声产生，且影响目标物质的出峰。另外，检测器的条件需要优化，操作相对繁琐。示差折光检测器也是通用型检测器[16-17]。虽然检测灵敏度相对较低，但氨基的流失不影响仪器的噪声和目标物质，且操作相对简单。本实验采用高效液相色谱- 示差折光检测法，建立一种同步检测胃蛋白酶制剂中葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量的分析方法，方法准确、简便、快速，具有较强的实用性。
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