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应用平板显色法测定单宁酶活力

安娜 | -> | 732| 0| 1430.765MB |单宁酶,溴甲酚绿,单宁酸,琼脂,平板显色法

安娜 安娜 | 文档量 |浏览量4234

摘 要 为直观、批量、准确测定单宁酶的活力,以单宁酸为底物,溴甲酚绿为显色剂,采用平板显色法测定单宁酶的活力. 对单宁酸浓度、溴甲酚绿浓度、琼脂浓度、酶加量以及反应时间的分析结果显示,平板组成为1%单宁酸、0.001%溴甲酚绿、3%琼脂,酶加量为30 μL,40 ℃下反应24 h,透明圈清晰度最高,获得标准曲线的决定系数为98%,验证反应结果显示该方法准确、稳定. 图7 表1 参11
    单宁酶(Tannase)又称单宁酸酰基水解酶,可降解单宁酸(Tannic acid,TA)中的酯键和缩酚键[1]. TA广泛存于植物叶子、水果、蔬菜等植物体内,能与蛋白、淀粉等生物大分子结合形成沉淀,降低可食用植物的营养价值. 单宁酶应用于食品加工领域,可用来处理速溶茶[2]、酒类等由单宁酸而产生的沉淀;可用于没食子酸(Galicacid, GA)和没食子丙酯等食品抗氧化剂的制备[3];在环保方面,可应用单宁酶处理皮革加工厂排放富含TA的污水[4].
    在单宁酶的研究中,获得一种有效的单宁酶活力测定方法至关重要. 目前,单宁酶测定方法有很多,如紫外光谱法、分光光度法[5]、比色法[1] [6]、气相色谱法[7]、蛋白质沉淀法[8]和实时检测法等[9],这些方法都存在不同程度的缺陷. 为获得一个准确、有效的单宁酶测定方法,本文基于TA/GA–溴甲酚绿显色原理,建立一个新的单宁酶活力测定方法.
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