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关键词：
SSR,籼稻亲本,遗传多样性,聚类分析
发表时间：
2013-12-07 16:24:28
摘 要 应用高效离子交换色谱和激光光散射仪检测器对不同致病力的青枯菌进行分析，建立了一种快速检测青枯菌致病力分化的新方法.青枯菌纯培养物经过高效离子交换色谱分离得到3个致病力不同的特征峰，大小依次为峰3组分＞峰2组分＞峰1组分.对10株青枯菌进行色谱分析，并结合番茄组培苗感染试验检测其致病力，结果发现，强致病力菌株经过色谱分离只在峰3的保留时间位置出现单一特征峰，在9 d内即可引起100%的番茄组培苗发病；若菌株经过色谱分离形成3个特征峰，则峰3所占的面积比越大，该菌株的致病性相对就越强.25株不同致病力青枯菌的验证试验表明了该方法的可行性，番茄组培苗发病率x与峰3面积比y之间呈现出良好的线性关系，回归方程y = 0.9581x + 5.4984，相关系数r = 0.986.通过对青枯菌色谱行为、致病力、细胞表面黏附的EPSⅠ含量三者之间相互关系的进一步研究，发现青枯菌的致病力越强，则细胞表面黏附的EPSⅠ越多，峰3所占的面积比就越大. 图3 表6 参15
利用离子交换色谱分析细菌完整细胞的研究始于20世纪70年代，其方法是将微生物悬浮液与树脂混合一段时间后，利用不同浓度的洗脱液将不同的细菌组分间歇地洗脱并分离. Marquis等利用阳离子交换层析柱Bio-Rex70分步洗脱，成功地实现了金黄色葡萄球菌和大肠杆菌混合菌的分离[1].但当时对细菌的分离一般采用常压色谱柱，分离时间长，容易染菌；同时由于分离材料上的局限，80~90年代用离子交换树脂分离细菌的研究趋于停止. 近年来，随着色谱技术和各种新型分离材料的研究和开发，又为应用色谱技术分离细菌提供了可能.
目前本课题组以传统的高效液相色谱系统为分离体系，以激光光散射仪为检测器，以强阴离子交换树脂ToyopearlTSKgel SuperQ-650C（粒径大小为90~150 μm）为分离介质，以具有完整构造和正常生理功能的细菌活细胞为研究对象，在国内首次建立起一套细菌高效离子交换色谱连接激光光散射仪检测器的分析体系，并应用于细菌活细胞的分离分析[2].
青枯菌，全称青枯雷尔氏菌（Ralstonia solanacearum），是全球主要的植物致病菌之一，可侵染44个科的300多种植物，其中包括许多具有重要经济价值的栽培植物，它所引起的细菌性青枯病是一种毁灭性的土传维管束病害，是世界上分布最广、危害最重且最难防治的重大细菌性病害之一[3~5].青枯菌在自然状态下，菌株混杂，致病力分化严重，对不同致病力青枯菌的分析，对于研究青枯菌的发生危害、种群动态、微生态关系具有重要意义. 本研究根据不同致病力青枯菌细胞表面化学组成与结构不同，带电性质不同，与离子交换树脂的吸附能力不同，利用高效离子交换色谱和激光光散射仪检测器对不同致病力青枯菌进行分析，建立了一种快速检测青枯菌致病强度的新方法. 该方法的建立，将为检测生防菌对青枯菌的致弱效果、筛选高效稳定的生防菌提供一种快速分析方法.
目前本课题组以传统的高效液相色谱系统为分离体系，以激光光散射仪为检测器，以强阴离子交换树脂ToyopearlTSKgel SuperQ-650C（粒径大小为90~150 μm）为分离介质，以具有完整构造和正常生理功能的细菌活细胞为研究对象，在国内首次建立起一套细菌高效离子交换色谱连接激光光散射仪检测器的分析体系，并应用于细菌活细胞的分离分析[2].
青枯菌，全称青枯雷尔氏菌（Ralstonia solanacearum），是全球主要的植物致病菌之一，可侵染44个科的300多种植物，其中包括许多具有重要经济价值的栽培植物，它所引起的细菌性青枯病是一种毁灭性的土传维管束病害，是世界上分布最广、危害最重且最难防治的重大细菌性病害之一[3~5].青枯菌在自然状态下，菌株混杂，致病力分化严重，对不同致病力青枯菌的分析，对于研究青枯菌的发生危害、种群动态、微生态关系具有重要意义. 本研究根据不同致病力青枯菌细胞表面化学组成与结构不同，带电性质不同，与离子交换树脂的吸附能力不同，利用高效离子交换色谱和激光光散射仪检测器对不同致病力青枯菌进行分析，建立了一种快速检测青枯菌致病强度的新方法. 该方法的建立，将为检测生防菌对青枯菌的致弱效果、筛选高效稳定的生防菌提供一种快速分析方法.
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