HPLC_ELSD法同时测定牛胆粉中3种胆酸类成分的含量

摘要目的: 建立HPLC- ELSD 同时测定动物类药材牛胆粉中胆酸、去氧胆酸和牛黄胆酸钠3种成分含量的方法。方法: 色谱柱为Ag ilent Zo rbax SB- C18 ( 416 mm @ 150 mm, 5 Lm ), 流动相采用乙腈- 012%甲酸进行梯度洗脱, 流速1 mL# m in- 1, 采用蒸发光散射检测器检测。结果: 胆酸、去氧胆酸和牛黄胆酸钠的线性范围分别为01 45~ 41 48, 01 21 ~ 4118, 0123~ 4156 Lg; 加样回收率( n= 9)分别为961 39%, 96178%, 971 37%。结论: 本方法简便、灵敏、准确, 可用于牛胆粉药材中胆酸、去氧胆酸和牛黄胆酸钠3种成分的含量测定。

    牛胆粉为牛科动物牛( B os Taurus domesticus Gemelin)的干燥胆汁粉末。具有清肝明目、利胆通肠、解毒消肿的功效, 临床多用于治疗风热目疾、黄疸、便秘、消渴、小儿惊风、痈肿痔疮等症。
    胆汁类药材常见的有猪胆汁、羊胆汁、蛇胆汁、牛胆汁、熊胆等, 其中主要含有胆汁酸类和胆
汁酸的盐类等成分, 它们均为以胆固醇为原料在动物肝脏中合成的胆酸类成分, 常见的有胆酸
( cholic ac id)、去氧胆酸( deoxycho lic acid)、猪去氧胆酸( hyodeoxycho lic acid)、鹅去氧胆酸( chenodeoxy cho lic acid)、熊去氧胆酸( ursodeoxycho lic ac id)以及牛黄胆酸钠( sod ium taurocho late )等成分, 这些成分目前被认为是胆汁类药材的主要有效成分。因此, 对这些成分的含量测定对于其药理作用、临床疗效、合理用药、制剂质量控制等均具有重要的意。胆酸类成分的含量测定方法文献报道较多的有比色法[ 1] 、薄层扫描法[ 2~ 4 ] 和高效液相色谱法[ 5 ~ 8] 。其中薄层扫描法报道最多, 如中国药典2005年版一部所收载牛黄药材中胆酸的含量测定即用薄层扫描法。这些方法大多报道从中成药制剂中测定1种或多种胆酸类成分的含量,很少有牛胆粉中胆酸类成分的含量测定。还有学者研究比较了药材天然牛黄和人工牛黄在胆酸类成分方面的区别[ 9] , 但所用的色谱条件不够理想,色谱分离度较低, 因此可能导致含量测定的结果不够准确。另外, 胆酸类成分因其紫外光谱吸收很弱, 用紫外检测器进行高效液相色谱测定时很难达到理想的效果。蒸发光散射检测有利于对在紫外检测下没有吸收的小分子成分进行测定,而胆酸类成分利用蒸发光散射方式可以有效地得到检测。为了更好地评价和控制药品的质量,建立更加高效准确的分析检测方法, 本文建立了利用高效液相色谱- 蒸发光散射检测( HPLC -ELSD) 同时测定牛胆粉中胆酸、去氧胆酸和牛黄胆酸钠3种成分的含量测定方法, 并取得了满意的效果。