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关键词：
RNAi,siRNA,非病毒载体
发表时间：
2013-08-20 11:33:21
摘要: 研究从噬菌体随机七肽库中筛选得到的新型bFGF 拮抗肽 (P7) 抑制bFGF 诱导的Balb/c 3T3 细胞增殖的作用机制。采用倒置显微镜观察不同浓度P7 对细胞形态的影响; 流式细胞术分析P7 对细胞周期的影响;Western blotting 检测P7 对bFGF 刺激的Balb/c 3T3 细胞中MAPK 通路的MEK、Erk1/2 信号分子活化水平的影响。结果显示, 在检测的浓度范围内, P7 对Balb/c 3T3 细胞形态无显著影响; P7 可改变bFGF 刺激下Balb/c 3T3的细胞周期, 减少S 期细胞比率, 使细胞阻滞在G0/G1 期; 并以剂量依赖的方式下调bFGF 激活的MEK、Erk1/2信号分子的磷酸化水平。P7 可能通过阻滞细胞在G0/G1 期, 下调MAPK 通路信号分子的活化水平, 从而抑制bFGF 诱导的Balb/c 3T3 细胞增殖。
碱性成纤维细胞生长因子 (basic fibroblast growth factor, bFGF) 属于肝素结合生长因子家族,最初由Gospodarowicz 于1974 年从牛脑垂体中提取,是一种对多种源自间质细胞和神经外胚层细胞具有明显促增殖作用的多肽因子[1, 2]。bFGF 在体内分布广泛且具有多种重要的生物学功能, 其时空表达及表达水平受到精密的调控。研究表明, bFGF 表达的异常上调与肿瘤等多种疾病密切相关, bFGF 被视为与bFGF 表达异常上调相关的疾病治疗的靶标之一[3−5]。作者前期采用噬菌体展示技术, 以bFGF 为靶标, 从噬菌体随机七肽库中筛选获得一种可抑制bFGF诱导的Balb/c 3T3 细胞增殖的bFGF 拮抗肽 (P7)[6]。本文在此基础上, 进一步深入探讨P7 抑制bFGF 诱导的Balb/c 3T3 细胞增殖的作用机制。
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