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气相色谱_质谱和液相色谱_质谱联用方法用于口腔癌代谢组学分析_和红兵

钱多多 | -> | 823| 7| 624.412MB |气相色谱-质谱联用,液相色谱-质谱联用,代谢组学,口腔癌

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摘要: 口腔癌的发病率占全身恶性肿瘤的第6 位,正确区分正常状态与良性和恶性口腔肿瘤,是恰当选择治疗方案的关键所在。本研究中,首先利用液相色谱-质谱和气相色谱-质谱联用方法分别得到健康人、良性口腔肿瘤患者和恶性口腔肿瘤患者血浆、尿液和唾液的代谢轮廓,然后应用正交信号校正的偏最小二乘法进行多变量统计分析。结果表明健康人、良性肿瘤患者和恶性肿瘤患者在血浆、尿液和唾液等3 种体液代谢中都可以被区分开,而且找到和鉴定出19 个重要差异代谢物。相关代谢通路分析显示,与健康人相比,良性和恶性口腔肿瘤患者都存在能量代谢紊乱和脂类代谢失衡的现象,但恶性口腔肿瘤患者还表现出三羧酸循环和肌醇代谢异常,这为临床诊断及治疗提供了重要信息。
    口腔癌是一类发生于唇、腭、舌、口底、牙龈和颊部的上皮源性恶性肿瘤。据统计资料表明,口腔癌的发病率占全身恶性肿瘤的第6 位,并呈逐年上升的趋势,已成为一种严重影响人类健康的疾病。目前口腔癌多采用以手术为主的综合治疗,但手术后患者5 年生存率只有50% 左右,仍然存在着口腔癌再次复发的风险[1]。代谢组学能够反映机体对病理生理及基因改变引起的代谢变化,在疾病诊断、病理学、中药疗效等临床研究方面显示出明显的优势[2 - 4]。基于1H-核磁共振( NMR) 的代谢组学方法已经被应用于发现口腔鳞状细胞癌( OSCC) 、口腔黏膜白斑( OLK) 以及健康人之间在血浆中的代谢差异[5]。类似的代谢组学方法也被用于不同时期的口腔癌患者血清样本中代谢特征研究,早期口腔癌也能得到明显区分[6]。
    除血液外,在口腔癌代谢组学研究中唾液也是重要的生物体液。与尿液相似,唾液获得方便且不会引起患者的紧张及疼痛。高效液相色谱-质谱法( HPLC-MS) 已应用到唾液代谢轮廓分析,可准确地区分口腔鳞状细胞癌、口腔黏膜白斑和扁平苔藓的病理特征[7]。最近,毛细管电泳-飞行时间质谱方法也用于唾液中代谢物的分析,找到了一些可用于口腔癌、胰腺癌和乳腺癌预测的差异代谢物[8]。然而,迄今为止还未见区分良性和恶性口腔肿瘤的代谢组学研究报道。此外,目前的口腔癌代谢组学研究仅限于单独的血浆或唾液样本,综合血浆、尿液和唾液3 种体液的代谢组学研究还未见报道。
    在本研究中,利用气相色谱-质谱( GC-MS) 和HPLC-MS 联用方法,我们对健康人、良性肿瘤患者和恶性肿瘤患者的血浆、尿液和唾液3 种体液的代谢轮廓进行研究。应用多元统计分析对代谢产物进行模式识别,将重要的差异代谢物选出并加以鉴定,并结合代谢通路对其进行相关讨论。
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