摘要] 目的: 建立鸡血藤黄酮类抗肿瘤活性部位( SSCE) 的HPLC-DAD 色谱指纹图谱,全面完整的反映了本部位内在的化学信息,并初步指认其中的主要化学成分。方法: 采用HPLC-DAD 检测,梯度洗脱的分析方法。Kromasil 100-5PHENYL色谱柱( 4. 6 mm × 250 mm,5 μm) ; 流动相0. 5% 冰醋酸水溶液-甲醇; 检测波长254 nm。结果: 建立了10 批鸡血藤药材中SSCE 的HPLC-DAD 色谱指纹图,获得了16 个共有峰,并有10 个色谱峰被指认。其中,1,3,4,5,8,9, 10, 12, 13, 16 号分别被确定为原儿茶酸,对羟基苯甲酸,表儿茶素,葛根素,大豆苷元,甘草素,毛蕊异黄酮,染料木素,芒柄花素和樱黄素。结论: 方法简便,精密度、重现性和稳定性良好,能有效控制中药鸡血藤黄酮类抗肿瘤活性部位( SSCE) 的质量,为筛选鸡血藤抗肿瘤活性成分、进行药理研究提供质量保证。
鸡血藤为豆科植物密花豆Spatholobus suberectus Dunn 的干燥藤茎。具有活血补血,调经止痛,舒筋活络之功效; 用于月经不调,痛经,经闭,风湿痹痛,麻木瘫痪,血虚萎黄等症[1]。现代药理研究,其具有激活造血系统、降血压、抗心律失调、抗病毒、抗肿瘤以及抗脂质过氧化的生理活性[2]。
首都医科大学附属北京中医医院院内制剂“固本抑瘤Ⅱ号”( 京药制字Z20053351) 治疗340 例肿瘤患者,取得较好疗效[3],通过对“固本抑瘤Ⅱ号”的拆方研究,发现方中行气活血组中药鸡血藤具有明显的抑瘤作用[4]。本课题组成功地从中分离纯化出富含黄酮类化合物的有效组分SSCE( 鸡血藤柱色谱提取物) ,并通过体外、体内药效学实验对其进行抗肿瘤作用研究。结果显示: SSCE 具有直接抗肿瘤作用,细胞周期阻滞是其确切抗肿瘤作用机制之一,阻滞肺癌细胞系A549 于S 和G2 /M 期,阻滞肠癌细胞系HT229 于G2 /M 期[5]; 低剂量SSCE 对小鼠Lewis 肺癌的抑制率最高,为28. 6%,同时具有抗转移作用,作用细胞周期为G1期,凋亡率各组无显著性差异。刺激骨髓造血,且无骨髓抑制作用[6]。
为有效控制SSCE 质量,保证药理研究的重现性、可靠性,本文建立了鸡血藤抗肿瘤活性部位色谱指纹图谱测定方法。