荭草素和异荭草素_牡荆素和异牡荆素2对碳苷化合物的快速检测与鉴定

摘要目的: 建立利用超高效液相色谱－ 电喷雾电离质谱( UPLC － ESI /MS) 快速检测和鉴定荭草素( orientin) 和异荭草素( isoorientin) 、牡荆素( vitexin) 和异牡荆素( isovitexin) 2 对碳苷化合物的方法，并将其应用于荭草中上述2 对碳苷化合物的分析鉴定。方法:采用BEH C18( 2. 1 mm × 150 mm，1. 7 μm) 色谱柱，柱温45 ℃，以甲醇( A) － 0. 1% 甲酸水溶液( B) 为流动相，梯度洗脱，流速0. 3 mL·min － 1 ; 通过电喷雾电离源( ESI) ，考察了以正离子多反应监测( MRM) 与不同能量下碰撞诱导解离( CID) 对标准对照品中这2 对碳苷化合物的检测和鉴定的可行性，利用所建立的方法筛选并鉴定了荭草粗提物中的这2 对异构体。结果:建立了MRM 筛选分析和CID 快速鉴定荭草素和异荭草素、牡荆素和异牡荆素2对碳苷化合物的方法。应用这一方法，完成了荭草中这2 对碳苷异构体的快速分析鉴定。结论:该方法简便、快速、可靠，可以用于荭草等含荭草素和异荭草素、牡荆素和异牡荆素2 对异构体的药材及其相关产品中这些化合物的快速分析鉴定。

    黄酮碳苷广泛存在于多种药用植物中，是多种中草药质量控制的重要指标。在这些碳苷中，有很多是同分异构体，结构差异不大，即使是在同一药材中，具有相同相对分子质量的化合物也往往很多，鉴定这些化合物的结构困难不小。荭草素和异荭草素、牡荆素和异牡荆素是2 对黄酮碳苷异构体［1 ～ 3］，是多种药材的主要有效成分。但是，由于结构差异小，化合物间具有相似的紫外吸收和一级质谱碎片，仅凭二极管阵列检测器和单极质谱仪等常规检测仪器与液相色谱仪串联难以在复杂的中草药粗提物中检测到这些异构体的存在并有效鉴定它们的结构。因此，开发一种快速检测和鉴定这些化合物的有效方法显得非常重要。Ferreres 等［4］利用离子阱的多级质谱功能鉴定了大量的黄酮氧苷和碳苷，建立了不同苷化位置异构体的鉴别方法; Pereira 等［5］利用源内CID 高分辨质谱技术有效地检测并鉴别了4 个药材中荭草素和异荭草素、牡荆素和异牡荆素2 对黄酮碳苷异构体。但是，由于一级质谱的灵敏度不高，源内CID 较难重现，这一方法的应用受到很大限制。
    荭草为蓼科植物红蓼Polygonum orientale L． 的干燥全草，为贵州少数民族用药，收载于《贵州省中药材质量标准) 1988 年版，荭草具有清热解毒、祛风除湿、活血消肿之功效，临床用于风湿性关节炎、冠心病、心胃气痛等［6］。根据文献［7］报道及李勇军等［8］对荭草化学成分的研究结果，荭草主要含荭草素、异荭草素、荭草苷A 和B、牡荆素、异牡荆素、槲皮素等黄酮类化合物和酚酸类物质原儿茶酸、没食子酸等。在荭草药材［9］及黄勇等［10］以荭草提取物研制的几个品种中，荭草素/异荭草素、牡荆素/异牡荆素这2 对碳苷化合物是其主要的药效物质基础，因此对这2 对异构体的快速检测鉴定意义重大。
    液相色谱－ 质谱联用技术( LC － MS) 是20 世纪90 年代成熟起来的一项新技术，具有灵敏度高、选择性强、分离和结构确证一次完成等特点［11，12］。考虑到多反应监测( MRM) 在质谱检测中的高灵敏度和二级质谱在位置异构体结构鉴别中较强的能力［13］，在本实验中，作者研究并开发了一种应用三重四极杆质谱的正离子多反应监测( MRM) 与碰撞诱导解离( CID) 分别快速检测和鉴定荭草素/异荭草素、牡荆素/异牡荆素这2 对黄酮碳苷的有效方法，并应用该方法实现了荭草中这2 对碳苷化合物的快速检测和鉴定，为荭草药材及其相关产品的进一步开发应用提供了实验
基础。