高速逆流色谱法分离制备丹酚酸B

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马萍萍 马萍萍 | 文档量 |浏览量60303

摘 要:采用高速逆流色谱法分离纯化丹参水溶性成分丹酚酸类物质,制备丹酚酸B 化学对照品。分离采用的溶剂系统为正己烷2乙酸乙酯2水2甲醇(1. 5 :5 :5 :1. 5) ,上相做固定相,下相做流动相,流速为1. 7 mL/ min ,仪器转速850 rpm ,进样量80 mg ,纯度用HPLC 方法测定。结果表明:一次分离可制备63. 4 mg 丹酚酸B ,其纯度为9816 %。该方法操作简单,可作为高纯度丹酚酸B 化学对照品的制备分离方法。
    丹参为唇形科植物Salvia miltiorrhiza Bge. 的干燥根及根茎,具有祛淤止痛、活血通经、清心除烦之功效[1 ] 。丹参主要含两类有效成分;一为脂溶性的二萜类化合物,二为水溶性的多聚酚酸类成分。实验研究证明,丹参水溶性成分具有多方面的药理活性,特别是表现出很强的抗氧化活性,这些药理作用吸引着研究人员开发出一批具有较高水平的药物应用于临床[2-3 ] 。丹酚酸B 为丹参中重要的水溶性有效成分之一,由三分子丹参素与一分子咖啡酸缩合而成,在2005 版中国药典中,已将丹酚酸B 作为丹参片的指标成分[1 ] 。据报道,丹酚酸B 有强烈的抗氧化和清除氧自由基的活性,其抗脂质过氧化作用约为维生素E 的1000 倍,对肾功能不全和肝损伤均有一定保护作用[4 ] 。分离制备丹参水溶性活性成分对进一步揭示丹参药效的物质基础和开发新的天然药物具有十分重要的意义。
    高速逆流色谱(High2speed Counter2current Chromatography ,HSCCC) 是近几十年来迅速发展的新型液-液分配色谱技术,其特点是被分离物质在两液相中进行分配分离,不需任何固相裁体,克服了固相载体带来的样品吸附、损失、污染、峰形拖尾等缺点,样品的回收率高,预处理简单[5 ] ,已被广泛应用于天然药物成分的分离制备和中药的分析鉴定中[6-9 ] 。目前,高效逆流色谱法分离纯化丹参脂溶性成分的研究已有文献报道[10-13 ] ,而丹参水溶性有效成分的高效逆流色谱法分离纯化国内还未见报道。本文采用HSCCC 分离、纯化、制备中药丹参的水溶性活性成分丹酚酸B ,为制备丹参水溶性有效成分的化学对照品提供了一种简捷实用的新方法。
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