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关键词：
生物,窖泥,微生物群落,微生态系统,研究,应用
发表时间：
2012-12-14 11:09:45
摘要： 以葡萄酒酵母和降解苹果酸裂殖酵母为亲本，通过正交实验优化了亲本原生质体的制备、再生以及融合的最佳条件，融合率为%)/$0%"1$，经筛选获得一株降解苹果酸能力强且发酵性能优良的融合菌株。融合株的体积较亲株大，为2/)#234 !5&，融合子的6’7 含量约为二亲株之和，为/)&$0%"13!8 9 :;,,，证明确为融合子；连续%# 次传代，融合子各项性能稳定。
苹果酸含量高会使葡萄酒有酸涩感，酒味粗硬，如何降解葡萄酒中的苹果酸一直是葡萄酒酿造中一个亟待解决的问题[%\2]。自从%4// 年<BXB:^_B 与K;O;@^T 首次实现酵母菌的原生质体融合以来[#]，原生质体融合技术已在工业上得到广泛应用，特别是酵母的原生质体融合技术应用更广[$\!&]，为利用原生质体融合技术培育新的葡萄酒酵母工程菌为葡萄酒的生物降酸提供了新的思路。葡萄酒酵母具有良好的发酵性能，但分解苹果酸能力差；降解苹果酸裂殖酵母具有极强的降解苹果酸能力，但发酵性能极差，且易产生异味[!2]，将这二亲本的优良性状融于一株菌中，正是本研究的目的所在。原生质体融合育种的整个过程受到诸多因素的影响，多数文献资料皆研究单因子的影响[!#]，而综合分析各因素的研究报道较少。本研究采用双灭活法进行亲本原生质体的遗传标记，将葡萄酒酵母与降解苹果酸裂殖酵母进行属间融合，正交实验获得了原生质体形成、再生及融合的最佳条件，并在此基础上得到一株降解苹果酸能力高达&%)/ ‘，且发酵性能优良的融合菌株。同时，对酵母融合株的部分特性进行了鉴定。
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