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胡椒碱与牛血清白蛋白的作用及Cu2 + 、Fe3 + 影响的研究

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摘 要: 采用荧光光谱及紫外光谱法研究了胡椒碱与牛血清白蛋白( bovine serum albumin, BSA)的相互作用。实验结果表明: 胡椒碱与BSA形成基态复合物从而猝灭BSA的内源性荧光, 猝灭原因主要为静态猝灭和非辐射能量转移作用。胡椒碱对BSA的猝灭速率常数Kq 为7.31 ×10^12 L ·mol- 1 · s- 1 ( 25 ℃)和7.20 ×10^12L·mol- 1 ·s- 1 (37 ℃) , 胡椒碱与BSA的结合常数KA 为1.02 ×10^7 L·mol- 1 (25 ℃)和1.11 ×10^7 L·mol- 1(37 ℃) , 结合位点数n为1.45 (25 ℃)和1.46 (37 ℃) 。根据FÊrster偶极- 偶极非辐射能量转移理论得到结合距离r为3.28 nm (25 ℃)和3.30 nm (37 ℃) 。通过热力学参数的计算, 确定胡椒碱与牛血清白蛋白的相互作用是一个熵增加和吉布斯自由能降低的自发过程, 主要作用力为疏水作用力。同步荧光光谱表明, 胡椒碱与BSA的相互作用没有引起BSA构象的变化。讨论了共存金属离子Cu2 + 、Fe3 +对胡椒碱与BSA相互作用的影响。
    药物进入人体后, 要通过血浆的储存和运输才能到达受体部位发挥药理作用[ 1 ] 。血清白蛋白是血浆中含量最丰富的重要载体蛋白, 它可逆地结合血液中的大多数内源性和外源性物质, 从而起到在体内存储和运输药物的作用[ 2 ] 。近年来, 以血清白蛋白为代表的蛋白质与中草药有效成分间的相互作用,已成为一个非常活跃的研究课题[ 3 - 5 ] , 这将有助于了解药物在体内的存在状态、运输、吸收、代谢及作用机制。而传统中蒙药复方制剂或生物体内的金属离子则会影响药物分子与蛋白的相互作用, 因此研究金属离子对药物与蛋白质相互作用的影响, 能够更全面地反映生物体内蛋白与药物相互作用的情况。胡椒碱(p iperine)是蒙药荜茇和胡椒等胡椒科植物的主要活性成分, 在镇痛、抗炎、抗癌等方面存在活性[ 6 ] 。胡椒碱与蛋白间相互作用的研究, 目前在国内外尚未见相关报道。本文运用荧光光谱、同步荧光光谱和紫外光谱研究了胡椒碱与牛血清白蛋白( bovine serum albumin, BSA)的相互作用, 并且进一步研究了Cu2 + 、Fe3 +对胡椒碱与BSA相互作用的影响, 探讨了胡椒碱对BSA荧光猝灭的机理, 为胡椒碱的体内转运和药理作用的深入研究提供有用的信息和数据。
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