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荧光法研究木犀草素与人血清白蛋白的相互作用

时启晨 | -> | 736| 0| 0.488059MB |木犀草素,人血清白蛋白,相互作用,荧光光谱,紫外吸收光谱

时启晨 时启晨 | 文档量 |浏览量13622

摘 要 用荧光光谱、同步荧光光谱和紫外吸收光谱方法, 研究了木犀草素与人血清白蛋白( HSA) 的相互作用。研究表明木犀草素对HSA 有较强的荧光猝灭作用, 根据不同温度下木犀草素对HSA 的荧光猝灭作用, 利用Stern2Volmer 方程处理实验数据, 表明木犀草素对HSA 的荧光猝灭作用属于静态猝灭。根据FÊrster 非辐射能量转移理论计算了木犀草素与HSA 间的结合常数和结合位点数, 求得了木犀草素与HSA间的结合距离r。热力学数据表明二者主要靠疏水作用力结合。同时用同步荧光光谱探讨了木犀草素对HSA 构象的影响。
    黄酮类化合物是一类具有重要药理活性的天然化合物[1 , 2 ] , 广泛存在于中药和植物的根、茎、叶及果实中。木犀草素是5 ,7 ,3′,4′2 四羟基黄酮化合物, 又称黄色黄素或黄示灵等, 具有抗菌、抗炎、解痉、祛痰、抗癌、抑酶等作用, 是浮萍、石韦、水蔓菁等多种传统中草药的有效成分。
    人血清白蛋白( human serum albumin , HSA) 是人血浆中含量最丰富的重要载体蛋白, 作为许多内源性和外源性化合物的存储和转运蛋白, 可与许多化合物分子发生相互作用。药物分子进入血液后不同程度地与血清白蛋白结合, 可以控制药物向受体释放, 避免药物迅速代谢。药物与血清白蛋白相互作用的研究是介于化学和生命科学之间的边缘性课题, 是化学生物学研究的重要内容[3 , 4 ] 。在分子水平上研究药物分子和生物大分子的相互作用, 探索药物与蛋白质、核酸的结合特性, 将有助于了解药物在人体内的吸收、分布、排泄、药理活性和毒性, 对于阐明药物的作用机理和进行药物设计以开发新药、指导临床用药, 以及在基因水平上治疗疾病和探索生命体系的化学过程和生物物理过程具有重要的理论和实践意义, 也是现代高通量药物筛选的重要基础。研究表明, 蛋白质是具有生理活性的黄酮类化合物的目标靶分子, 黄酮类药物能够与蛋白质分子特异性结合, 从而发挥其药理作用[2 ] , 有关木犀草素与HSA 之间相互作用的研究,目前尚未见报道。
    荧光光谱法是研究生物大分子, 特别是蛋白质与各种有机小分子、离子和无机化合物相互作用的重要手段。本文应用紫外光谱和荧光光谱, 研究了木犀草素与HSA 的荧光猝灭机理, 测定了木犀草素与HSA 的结合常数、结合位点数、热力学参数等, 并确定了二者间的结合力类型, 这些基础数据对于阐明木犀草素在体内的运输过程及其作用机理具有十分重要的意义。
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