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关键词：
预混,重组人胰岛素,效价,含量测定,高效液相色谱
发表时间：
2012-03-06 13:51:25
小样本量预混精蛋白重组人胰岛素注射液的效价测定
魏冰洁 | -> | 1147| 1| 0.176608MB |预混,重组人胰岛素,效价,含量测定,高效液相色谱
摘要目的:建立小样本量( ＜ 1 mL) 预混精蛋白重组人胰岛素注射液的效价检测方法，并进行相关的方法学验证。方法:采用C18柱( Phenomenex， 4. 6 mm × 250 mm，5 μm) ; 流动相为0. 2 mol·L － 1 硫酸盐缓冲液－ 乙腈( 73∶ 27) ; 检测波长为214 nm; 流速1. 0 mL·min － 1 ; 柱温40 ℃。结果:重组人胰岛素溶液在6 h 内稳定性良好，低、中、高浓度组的加样回收率分别为96. 7%，97. 0%， 96. 7%，小样本量法与大样本量法( 即中国药典规定方法) 检测同批次预混精蛋白重组人胰岛素注射液效价，结果无显著区别。结论:本文建立的小样本量法适用于评价单只预混精蛋白重组人胰岛素笔芯及使用中笔芯的实际效价，对检测具有重要的实用价值。
糖尿病是由胰岛素分泌缺陷及其生物学作用障碍引起的以高血糖为特征的代谢性疾病，该病常导致各种脏器，尤其是眼、肾、神经及心血管的长期损害、功能不全和衰竭［1］。糖尿病作为一种常见的多发性疾病，其带来的慢性并发症严重影响患者的生活质量和生存寿命，并给家庭和社会带来沉重的经济负担［2］。
胰岛素( Insulin) 是治疗糖尿病的重要药物。它是由胰岛β 细胞产生的多肽类激素，其由51 个氨基酸组成，分子量近6000。1921 年Banting 与Best 首次从牛胰腺中分离出胰岛素并于1922 年用于临床治疗糖尿病。
随着DNA 重组技术的出现，重组人胰岛素已经成功的进行大规模生产并投入到临床使用中。为了将患者的血糖水平尽量平稳的控制在合理范围内，通过不断的工艺改进，重组人胰岛素发展出了短效、中效、长效以及预混型制剂，本文的研究对象即为70 /30 预混型精蛋白重组人胰岛素注射液，其中含有30%重组人胰岛素( 短效人胰岛素) 和70% 精蛋白重组人胰岛素( 中效人胰岛素) 。与此同时，高效液相色谱( HPLC) 法等先进的理化测定法代替烦琐的生物测定已成为胰岛素效价检测的必然趋势［3］。
目前，预混精蛋白重组人胰岛素笔芯( 以下简称笔芯) 的效价检测主要依据中华人民共和国药典( 2010 年版) 二部中精蛋白重组人胰岛素注射液的“含量测定”项下的规定，采用合并多只笔芯的胰岛素药液，使其体积不小于1 mL 后，按照中国药典方法“取本品，每1 mL 中加9. 6 mol·L － 1 盐酸溶液3μL”进行供试液的制备。但该方法仅适用于评价多只笔芯的平均效价，无法真实反映每只笔芯的实际效价，具有一定的局限性。并且在胰岛素注射笔的临床使用中，随着笔芯中药液体积的减少，现行的方法将不适用于检测使用中单只笔芯的实际效价。因此，建立可行的小样本量预混精蛋白重组人胰岛素注射液的效价检测方法，对于评价单只笔芯的初始效价及使用中的实际效价具有重要的实际意义。
本文在中国药典( 2010 年版) 的基础上，建立了小样本量( ＜ 1 mL) 预混精蛋白重组人胰岛素注射液的效价测定方法，并进行了相关的方法学验证。
胰岛素( Insulin) 是治疗糖尿病的重要药物。它是由胰岛β 细胞产生的多肽类激素，其由51 个氨基酸组成，分子量近6000。1921 年Banting 与Best 首次从牛胰腺中分离出胰岛素并于1922 年用于临床治疗糖尿病。
随着DNA 重组技术的出现，重组人胰岛素已经成功的进行大规模生产并投入到临床使用中。为了将患者的血糖水平尽量平稳的控制在合理范围内，通过不断的工艺改进，重组人胰岛素发展出了短效、中效、长效以及预混型制剂，本文的研究对象即为70 /30 预混型精蛋白重组人胰岛素注射液，其中含有30%重组人胰岛素( 短效人胰岛素) 和70% 精蛋白重组人胰岛素( 中效人胰岛素) 。与此同时，高效液相色谱( HPLC) 法等先进的理化测定法代替烦琐的生物测定已成为胰岛素效价检测的必然趋势［3］。
目前，预混精蛋白重组人胰岛素笔芯( 以下简称笔芯) 的效价检测主要依据中华人民共和国药典( 2010 年版) 二部中精蛋白重组人胰岛素注射液的“含量测定”项下的规定，采用合并多只笔芯的胰岛素药液，使其体积不小于1 mL 后，按照中国药典方法“取本品，每1 mL 中加9. 6 mol·L － 1 盐酸溶液3μL”进行供试液的制备。但该方法仅适用于评价多只笔芯的平均效价，无法真实反映每只笔芯的实际效价，具有一定的局限性。并且在胰岛素注射笔的临床使用中，随着笔芯中药液体积的减少，现行的方法将不适用于检测使用中单只笔芯的实际效价。因此，建立可行的小样本量预混精蛋白重组人胰岛素注射液的效价检测方法，对于评价单只笔芯的初始效价及使用中的实际效价具有重要的实际意义。
本文在中国药典( 2010 年版) 的基础上，建立了小样本量( ＜ 1 mL) 预混精蛋白重组人胰岛素注射液的效价测定方法，并进行了相关的方法学验证。
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