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固体进样石墨炉原子吸收光谱技术在测定大鼠脑铁含量中的应用

俞辰晨 | -> | 773| 1| 1124.537MB |石墨炉原子吸收光谱,固体进样,脑区,Fe含量

俞辰晨 俞辰晨 | 文档量 |浏览量18109

摘􀀁 要􀀁 石墨炉原子吸收光谱法是测定动物脑组织Fe 含量的常用方法, 然而由于传统的液体进样方法中,样品前处理阶段用硝酸消解周期长, 成本高耗时长, 限制了原子吸收光谱技术在测定动物组织中Fe 含量的应用。文章以SD 大鼠脑部海马、纹状体、皮层为实验材料, 采用固体进样器进样, 利用石墨炉原子吸收光谱技术对各组织中的Fe 含量进行了测定, 并与传统法方法􀀁 􀀁 􀀁 硝酸消解样品后, 液体进样的石墨炉原子吸收光谱测定结果做了比较, 结果表明这两种方法所测结果无显著性差异, 但应用固体进样法, 样品前处理阶段明显简单, 显著节省了样品准备时间, 降低了工作量, 使测定时间明显缩短, 成本明显降低, 并且能够有效避免外界因素对测定结果的影响, 为固体进样法的进一步应用奠定了基础。
    Fe 是人体的必需微量元素。作为血红蛋白、细胞色素、各种氧化还原酶的必要组成成分, 体内众多的生化反应都需要Fe 参与。Fe 代谢紊乱可引起多种常见疾病, 例如, Fe 缺乏可造成贫血、智障等; 而Fe 过量则可促发大量自由基, 引起神经退行性病变及许多与老年相关的疾病[ 1] 。因此, 研究脑Fe 代谢调控的分子机制具有十分重要的理论和现实意义。
    准确、快速检测脑Fe 含量是这一研究过程中的重要环节。常用的实验动物一般是小鼠或大鼠, 脑部各个区域都很小,而且组织内的含Fe 量很低, 常用的组织测Fe 方法不能满足对不同脑区Fe 含量的测定。石墨炉原子吸收光谱法( g raphitefur nace atomic absor pt ion spect rometr y, GFAAS) 便成为了测定不同脑区Fe 含量的手段[2- 4] 。
    原子吸收光谱法是基于气态的基态原子外层电子对紫外光和可见光的吸收为基础的分析方法。其基本原理为: 从空心阴极灯或光源中发射出一束特定波长的入射光, 在原子化器中待测元素的基态原子蒸汽对其产生吸收, 未被吸收的部分透射过去。通过测定吸收特定波长的光量大小, 来求出待测元素的含量[5] 。石墨炉原子吸收光谱法是将处理好的待测样品注入可被加热的石墨管中, 经过预先设定的干燥、灰化、原子化等升温程序使共存机体成分蒸发出去, 同时在原子化阶段的高温下Fe 化合物解离为基态原子蒸气, 并对空心阴极灯发射的特征谱线产生选择性吸收。在选择的最佳条件下, 通过背景扣除, 测定样品中Fe 的吸光度, 从而得出样品中Fe 含量[ 6] 。
    一直以来, 对不同脑区Fe 含量的测定首先要对样品进行长时间的硝酸消解, 然后再多次稀释, 不仅浪费了大量时间还有可能造成很大误差, 对研究脑Fe 水平变化带来了很大不便[ 2, 3] 。
    采用固体进样的石墨炉原子吸收光谱是新近发展起来的技术, 由于其样品处理简单易行, 所需样品量很少, 为测定动物微量组织中Fe 的含量提供了很大方便, 目前为止, 尚未发现应用该方法测定脑Fe 含量的报道。
    本研究运用固体进样石墨炉原子吸收光谱技术测定了年龄对大鼠大脑皮层、海马、纹状体等脑区Fe 水平的影响, 并与传统的测定方法进行了比较。
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