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北京早园竹叶有机提取物对细胞DNA断裂损伤的保护与修复作用

宋宇晨 | -> | 1071| 0| 0.286924MB |竹叶提取物,DNA,损伤,单细胞凝胶电泳,H2O2

宋宇晨 宋宇晨 | 文档量 |浏览量20614

摘要:目的探讨北京早园竹叶提取物对H2O2诱导的中国仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)DNA 损伤的保护与修复作用。方法采用乙醇-水溶液超声辅助提取方法制备竹叶粗提物,经SP825 大孔树脂吸附分离,分别以10%,30%,60%的乙醇水溶液洗脱得到不同成分的提取液,并用高效液相色谱(HPLC)定性分析早园竹叶提取物的主要活性成分;采用单细胞凝胶电泳法(SCGE)检测25~400 μg/ml H2O2对CHO-K1 细胞的DNA 损伤作用以及不同组分竹叶提取物在25~50μg/ml 浓度下抗H2O2 诱导DNA 损伤的保护与修复作用。结果竹叶总提物中含有C-黄酮苷类和酚酸类两类活性物质,经SP825 大孔树脂纯化后,10%乙醇洗脱成分主要成分为酚酸类物质,30%乙醇洗脱成分中主要为C-黄酮苷类物质。H2O2 具有明显的DNA 链断裂作用,导致彗星尾长明显增加。全组分、10%组分、30%组分在6.25 μg/ml 浓度下对H2O2 诱导的CHO-K1 细胞DNA 损伤的修复作用最强,且30%组分的修复作用最明显。在12.5 μg/ml 下预防H2O2 诱导的CHO-K1 细胞DNA 损伤作用最强,其保护作用均以全组分为明显,由此说明C-黄酮类活性成分在抗遗传毒性作用中起重要作用。结论一定浓度的早园竹叶提取物对H2O2诱导的CHO-K1 细胞DNA 损伤具有保护与修复作用。
    竹子是当今世界最具有使用价值的植物之一。我国的竹子资源丰富,素有“竹子王国”之称,境内有竹类40 多属、400 余种,竹林面积约400 万hm2[1],因此,开发利用竹类资源的意义十分重大。早园竹(North Ph. praecox)为禾本科、刚竹属竹种[2],喜温暖湿润气候。早园竹杆高叶茂,生长强壮,耐旱力抗寒性强,现已成为北京地区应用最为广泛的园林竹种[3]。近年来有研究表明竹叶提取物中含有大量的黄酮类化合物和其他生物活性成分,如酚类、蒽醌类[4]、香豆素类内酯[5]、活性多糖[6]、特种氨基酸[7]等与人体生命活动有关的化合物。其中竹叶黄酮类化合物是竹叶提取物中的主要活性成分,具有抗脂质过氧化[8]、抗衰老作用、清除人体内活性氧自由基[9]、提高SOD 以及GSH-Px 的活力、防止血管硬化,预防老年性痴呆症等功效,是一种具有广阔开发前景的天然药物资源。一些植物黄酮类提取物在食品、药品和化妆品中已得到了一定的应用。不同种类的竹叶,其总黄酮含量和有效成分会有所不同,新叶中的黄酮类化合物高于老叶。竹叶总黄酮含量平均约为2%[10]。单细胞凝胶电泳是近年来刚建立的一种检测DNA 损伤和修复的技术,它具有简便、快速、敏感性高、应用范围广等优点,是现今细胞遗传毒性检测的常用方法[11-13]。已有学者研究对早园竹竹叶活性成分分离纯化进行了研究[14-17],并证明竹叶粗提取物具有自由基淬灭作用和抗DNA 氧化损伤的作用。但对竹叶不同提取组分活性作用研究的报道较少。笔者对在北京有广泛分布的早园竹竹叶的活性成分进行提取、分离及其活性机制的研究,为尚处于起步阶段的早园竹活性物质研究提供了科学依据。
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