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粗糙脉孢菌突变菌株合成漆酶的发酵条件研究

朱晓坤 | -> | 823| 0| 0.200783MB |粗糙脉孢菌,突变菌株,漆酶,发酵条件

朱晓坤 朱晓坤 | 文档量 |浏览量46058

摘要: 研究了影响粗糙脉孢菌突变菌株合成漆酶的一些摇瓶发酵条件,包括通气量、培养温度、甲醇浓度、,-!.浓度等。结果表明,在#"" /0 三角瓶中装入含&#" !/12 3 0 ,-!.浓度的发酵培养基4556 #" /0,接种后于+" 7,!"" 8 3/9: 培养% ;,用")# <甲醇诱导,在第# 天时漆酶酶活最高可达+)== - 3/0。
    漆酶(2BCCBDE) 又称苯二醇、氧化还原酶(F,&)&")+)!),是一类含铜的多酚氧化酶,具有广泛的底物作用范围,可以氧化降解单酚、邻苯二酚和对苯二酚等多种酚类化合物及其衍生物,也可以氧化降解一些不含酚羟基的酚类类似物G&H!I。因此在许多方面有较大的应用价值,除了在环保、废水处理、纸浆漂白、生物免疫检测等方面应用外,还可应用在食品相关领域上,比如用漆酶预处理麦芽汁,使其中的酚类物质氧化,可提高啤酒的质量和透明度;经过固定化漆酶处理的葡萄汁和葡萄酒,去除其中的酚类物质后,能长期贮存,且保持澄清状态。在发酵工业,漆酶能减少酵母酒精发酵材料中的酚类抑制物,提高酒精产量G+I。
    粗糙脉孢菌(!"#$%&’%$( )$(&&()是一种很重要的研究微生物遗传学的模式子囊菌G*I,是少数能产生漆酶的子囊菌。粗糙脉孢菌漆酶是一种诱导型漆酶,其合成易受环境条件(特别是诱导物)的影响,在无诱导剂存在的条件下,它几乎不产漆酶,在有诱导剂存在的条件下,它可以产生一定量的漆酶G#H%I。我们尝试进行粗糙脉孢菌漆酶合成的诱导研究,虽然经过(H% ; 诱导培养后可得到*H# - 3/0 的漆酶产量,但这一过程太长,培养时易被污染,很难工业化生产,而利用基因工程技术则有可能获得漆酶的高产菌株。为此,我们利用了基因工程技术及定点突变技术成功构建粗糙脉孢菌产生漆酶的突变菌株,突变酶的最适作用JK 比亲本酶提高了! 个单位,突变酶的JK 稳定性范围也比亲本酶有所扩大,而其他的酶学性质则没有变化,为了进一步开发应用这种突变酶,还对突变菌的发酵条件进行了研究。
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