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关键词：
浓香型白酒,人工老窖,老化,复合菌
发表时间：
2013-01-21 17:24:28
自由溶液和筛分介质条件下芯片DNA瞬间等速电泳预浓缩的比较
归鸿 | -> | 1302| 0| 0.372994MB |芯片电泳,等速电泳,预浓缩,脱氧核糖核酸
摘 要 利用芯片电泳方法考察瞬间等速电泳筛分电泳偶联分析的结果, 比较了自由溶液和筛分介质中DNA瞬间等速电泳的预浓缩效果。结果显示, 相比较于筛分介质条件, 自由溶液瞬间等速电泳有利于改善预浓缩和后续筛分电泳分离效果。对此结果的解释是: 自由溶液条件下DNA 迁移速度的提高可以延长瞬间等速电泳持续时间, 有利于提高预浓缩效率。此外, 样品压缩区带在自由溶液筛分介质界面的二次富集也是预浓缩效果得到改善的原因之一。
在线预浓缩是一种简便有效的提高毛细管电泳和芯片电泳检测灵敏度的手段[ 1] 。用于DNA 在线预浓缩的方法包括碱堆积( Base stacking) [ 2] 、场放大堆积( Fieldamplified samp le stack ing) [ 3] 和等速电泳( Isotachophoresis, ITP) 预浓缩[ 4, 5] 等。瞬间等速电泳( T ransient iso tachophoresis, tITP) 是一种简化的等速电泳预浓缩方式, 以样品基质中的离子为前导或尾随离子, 可以简化操作并良好地兼容高盐样品[ 6, 7] 。通过偶联tITP和筛分电泳( CGE ), 可以简单有效地实现高盐DNA 样品的预浓缩和分离[ 8, 9] 。瞬间等速电泳预浓缩效果取决于前导离子浓度和等速电泳持续时间, 而后者由样品基质与样品离子以及样品基质与背景缓冲液中同离子的迁移速度差决定[ 10] 。Liu等[ 8] 发现, 筛分介质条件下较低的DNA迁移速率是限制tITP预浓缩效率的因素, 提高样品迁移速率有利于改善预浓缩效果; Schans等[ 11] 指
出, 从tITP到CGE 的分离模式转换可以在自由溶液筛分介质界面实现。微流控芯片具有设计灵活的特点和优势, 非常适合于实现这种复合式分离; Qi [ 12] 和W ang[ 13] 等分别报道了基于芯片的自由溶液ITP或tITP与CGE偶联用于DNA 预浓缩和分离。这些研究结果显示自由溶液中DNA 样品具有更高的预浓缩效率, 有利于提高后续CGE 的分离效果。
本研究采用激光诱导荧光检测芯片电泳方法, 比较了在自由溶液和筛分介质条件下芯片DNA 瞬间等速电泳预浓缩效果并分析了相关机制, 为改善tITP与CGE 偶联分离效果进行了有益的尝试。
出, 从tITP到CGE 的分离模式转换可以在自由溶液筛分介质界面实现。微流控芯片具有设计灵活的特点和优势, 非常适合于实现这种复合式分离; Qi [ 12] 和W ang[ 13] 等分别报道了基于芯片的自由溶液ITP或tITP与CGE偶联用于DNA 预浓缩和分离。这些研究结果显示自由溶液中DNA 样品具有更高的预浓缩效率, 有利于提高后续CGE 的分离效果。
本研究采用激光诱导荧光检测芯片电泳方法, 比较了在自由溶液和筛分介质条件下芯片DNA 瞬间等速电泳预浓缩效果并分析了相关机制, 为改善tITP与CGE 偶联分离效果进行了有益的尝试。
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