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关键词：
p21shRNA,姜黄素,肝癌细胞Huh7,细胞凋亡
发表时间：
2013-07-25 09:53:26
UPLC法同时测定冬凌草中5种有效成分的含量
王子妮 | -> | 432| 0| 0.210869MB |超高效液相色谱法,冬凌草,冬凌草甲素,冬凌草乙素,迷迭香酸,齐墩果酸,熊果酸
摘要目的: 建立超高效液相色谱法同时测定冬凌草药材中冬凌草甲素、冬凌草乙素、迷迭香酸、齐墩果酸和熊果酸5 个主要有效成分的含量。方法: 采用WATERS UPLC 色谱系统，ACQUITY BEH Shield RP18色谱柱( 2. 1 mm × 100 mm， 1. 7 μm) ; 流动相为0. 1%甲酸甲醇溶液( A) － 0. 1%甲酸水溶液( B) ，梯度洗脱( 0 ～ 9 min， 70%A→57% A; 9 ～ 10 min， 57% A→48% A; 10 ～ 11 min，48%A→48%A; 11 ～ 14 min， 48% A→14% A; 14 ～ 22 min， 14% A→14% A) ，流速0. 2 mL·min － 1 ; 检测波长为250 nm ( 0 ～ 12. 40min 测定冬凌草甲素、冬凌草乙素和迷迭香酸) 和210 nm( 12. 41 ～ 22. 00 min 测定齐墩果酸和熊果酸) ; 柱温23 ℃。结果: 本方法可在22 min 内完成5 个成分的色谱分析，且各成分色谱峰之间具有良好的分离度; 冬凌草甲素、冬凌草乙素、迷迭香酸、齐墩果酸和熊果酸的线性范围分别为0. 110 ～ 0. 990 μg( r = 0. 9997) ， 0. 012 ～ 0. 108 μg( r = 0. 9991) ， 0. 030 ～ 0. 270 μg( r = 0. 9993) ， 0. 011 ～0. 099 μg( r = 0. 9991) ， 0. 011 ～ 0. 099 μg( r = 0. 9996) ; 平均加样回收率( n = 9) 分别为100. 9%， 95. 4%， 102. 1%， 97. 1%， 99. 0%。结论: 所建立的超高效液相色谱法简便快速，结果准确可靠，重复性好，可用于冬凌草药材的质量控制与评价。
冬凌草Rabdosia rubescens ( Hemsl． ) Hara 为唇形科香茶菜属植物，主要分布在黄河流域及其以南广大地区。生于山坡路旁、林中及草地上，在河南、安徽、江苏等省资源极其丰富。有关资料表明［1，2］，冬凌草具有清热解毒、抗菌消炎、消肿止痛、抗肿瘤等作用，临床上主要用于治疗急、慢性咽喉炎、扁桃体炎等症。冬凌草化学成分复杂，含有从单萜、倍半萜到二萜、三萜等一系列萜类物质。冬凌草甲素与乙素［3，4］是从冬凌草中提出的四环二萜类抗肿瘤成分，实验证明，冬凌草甲素具有明显的抗肿瘤活性，临床上多用于肝癌、食管癌及胰腺癌的治疗，并取得了一定疗效; 冬凌草乙素也具有一定的抗肿瘤作用;迷迭香酸具有较好的抗菌、消炎、止痛的功效5］; 齐墩果酸和熊果酸也具有一定的抗肿瘤、抗炎、抗HIV等药理作用［6，7］。
冬凌草以其丰富的资源优势，良好的药理活性已经成为目前常用的中草药，是具有广阔开发前景的药用资源。有关冬凌草中有效成分含量测定的报道，目前仅限于一两种成分的同时测定。本文建立了超高效液相色谱( UPLC) 法含量测定方法，并对采自不同产地、不同部位的冬凌草中冬凌草甲素、冬凌草乙素、迷迭香酸、齐墩果酸和熊果酸5 个有效成分进行了同时测定与分析，为更客观有效地控制及评价冬凌草药材的质量提供了参考依据。
冬凌草以其丰富的资源优势，良好的药理活性已经成为目前常用的中草药，是具有广阔开发前景的药用资源。有关冬凌草中有效成分含量测定的报道，目前仅限于一两种成分的同时测定。本文建立了超高效液相色谱( UPLC) 法含量测定方法，并对采自不同产地、不同部位的冬凌草中冬凌草甲素、冬凌草乙素、迷迭香酸、齐墩果酸和熊果酸5 个有效成分进行了同时测定与分析，为更客观有效地控制及评价冬凌草药材的质量提供了参考依据。
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