多溴联苯醚对鲫鱼组织DNA损伤及p53蛋白表达的影响

摘要：以鲫鱼（Carassius auratus）为试验材料，研究了经不同浓度的2，2’，4，4’－四溴联苯醚（PBDE－47）和十溴联苯醚（PBDE－209）暴露后，鲫鱼体内DNA 损伤产物8－羟基脱氧鸟苷（8－OHdG）的含量及p53 蛋白的水平。结果表明，采用浓度为0．10～5．00 mg·L－1 的PBDE－47 和10．0～50．0 mg·L－1 的PBDE－209 处理鲫鱼20 d，除了0．10 mg·L－1 PBDE－47 和10．0 mg·L－1 PBDE－209 浓度组的8－OHdG 和p53 蛋白含量与对照组相比无显著差异（P>0.05），其余各浓度组的8-OHdG 和p53 蛋白含量均随PBDE-47 和PBDE-209浓度增加而逐渐上升，呈显著的相关关系（P<0.01），且8-OHdG 和p53 蛋白之间也呈显著的正相关。说明PBDE-47 和PBDE-209对鲫鱼组织的DNA 产生了损伤，具有遗传毒性影响。

    多溴联苯醚（polybrominated diphenyl ethers，PBDEs）属于溴系阻燃剂的一种，应用广泛[1]，具有一定的挥发性，可随大气长距离迁移，且亲脂性强、化学性质稳定、可随食物链生物富集和放大，是一种持久性有机污染物[2]。自1981 年首次在瑞典的梭鱼、鳗鲡中检出后，PBDEs 已被发现在多种环境介质、人体和生物材料中广泛存在，且含量呈逐年增加的趋势[3]。PBDEs已被认为是普遍存在的环境污染物，对其环境问题的研究成为当前环境科学的一大热点。迄今的研究
结果发现，PBDEs 对生物体的神经系统、甲状腺、肝和肾的影响较为明显[4-5]。在PBDEs 中，2，2′，4，4′-四溴联苯醚（PBDE-47）是分布最广、生物材料中含量最高、对生物和人体毒性最强的多溴联苯醚同系物之一[6]，而十溴联苯醚（PBDE-209）是中国国内产量最大的含溴阻燃剂。目前国内外学术界对不同分子量的多溴联苯醚的毒性研究主要集中在哺乳动物上[2，4]，且存在争议[7-10]；对鱼类的影响仅局限在组织残留方面[3]，对水生动物组织DNA 损伤的影响及由此而引发的p53 蛋白的表达尚未见报导，因此有必要进行这方面的研究。
    化学毒物导致的细胞氧化应激是机体损伤的重要机制之一，过去多注重于脂质过氧化，近年来DNA和蛋白质的氧化损伤引起极大关注[11]。由于DNA 在细胞复制过程中起着重要的信息传递作用，其氧化损伤可导致衰老、肿瘤及相关疾病。DNA 氧化损伤的生物标志物通常为DNA 加合物，在已发现的20 多种DNA 氧化损伤加合物中，8-羟基脱氧鸟苷（即8-hydroxy-2-deoxyguanosine，8-OHdG） 最受关注，它是DNA 中的脱氧鸟苷经羟自由基（·OH）进攻其C-8 位形成的，其在机体内生成量相对较高，存在普遍且稳定，不受食物影响，能用灵敏度较高的分析方法检测，因此是当今DNA 氧化损伤研究中的热点[12]。而p53蛋白在维持细胞正常生长、抑制恶性增殖中起着重要的作用。p53 基因时刻监控着基因的完整性，如果检测到DNA 受损，p53 就激活其转录水平的细胞周期阻滞，停止细胞分裂，直到DNA 得到修复[13]，或者调控细胞走向死亡。当p53 不能执行此功能时，往往就导致细胞发生癌变。当DNA 受到损伤时可反馈性地激发p53 基因的表达，引起细胞内野生型p53 蛋白的表达增加[14]。本文以8-OHdG 和p53 蛋白作为生物标志物，研究不同分子量的多溴联苯醚对鲫鱼DNA 的损伤作用，为进一步探讨多溴联苯醚的分子毒理机制提供依据。