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镉对长江华溪蟹金属硫蛋白mRNA表达的诱导及低分子量壳聚糖的联合作用

庄若烟 | -> | 1193| 0| 0.261883MB |长江华溪蟹,金属硫蛋白mRNA表达,镉,低分子量壳聚糖

庄若烟 庄若烟 | 文档量 |浏览量23490

摘要: 采用实时荧光定量PCR 法,研究了不同浓度镉( Cd2 + ) 对长江华溪蟹( Sinopotamon yangtsekiense) 金属硫蛋白( metallothionein,简称MT) 在肝胰腺、鳃、肌肉和心脏中mRNA 表达的诱导作用及低分子量壳聚糖( low molecular weight chitosan,简称LMWC) 的联合作用. 镉浓度分别为29、58 和87 mg·L - 1 ,镉与LMWC 的联合作用组分别为58 mg·L - 1 Cd2 + + 20 mg·L - 1 LMWC、58 mg·L - 1 Cd2 + + 40 mg·L - 1 LMWC 和58 mg·L - 1Cd2 + + 80 mg·L - 1 LMWC; 处理时间均是4 d. 结果显示,与对照组相比,在镉胁迫下,长江华溪蟹肝胰腺、鳃和肌肉组织中MT mRNA 表达显著增加,而心脏中的变化不显著. 在LMWC 和镉共同作用下,MT mRNA 的表达在肝胰腺和鳃组织中比镉单独作用( 58 mg·L - 1 Cd2 + ) 显著下降,而肌肉和心脏中的变化没有统计学意义. 镉能诱导长江华溪蟹4 种组织中MT mRNA 的表达,且具有组织差异性; 在LMWC 与镉联合作用下,MT mRNA 的表达有一定程度的下降.
    镉( cadmium,Cd) 在水生生态系统中通过食物链的逐级放大,危害生态系统,最终对人体产生影
响. 研究表明,大多数重金属能诱导水生动物肝脏、肾脏和脑等一些重要器官金属硫蛋白( metallothionein,简称MT) 的生物合成增加( 任宏伟等, 2001) . 金属对MT 的诱导作用发生在转录水平,它与MT 基因上游序列中的金属效应元件( MREs)结合,从而启动MT 的mRNA 转录( Mahmood et al. ,2009) ,这种转录调节与重金属浓度密切相关,可反映水环境中的重金属污染程度( 陈春等,2009) . 因此,MT mRNA 的转录水平可以作为一种监测水体受重金属毒害的生物标志物( Ma et al. ,2009) .壳聚糖( chitosan) 是甲壳素脱乙酰基后的降解产物,是自然界中唯一大量存在的碱性氨基多糖.低分子量壳聚糖( 1ow molecular weight chitosan,简称LMWC) 是壳聚糖经降解形成的可溶于水的低分子聚合物,具有抗氧化、抗菌、抗肿瘤等作用( Yinetal. ,2009) . 在抗氧化作用方面,壳聚糖具有很强还原能力,能有效清除羟基自由基、超氧阴离子( Feng et al. ,2007; Kim et al. ,2007) 等自由基,减少脂质过氧化产物丙二醛( MDA) 的生成量,提高超氧化物歧化酶( SOD) 、过氧化氢酶( CAT) 、谷胱甘肽过氧化物酶( GPx) 等抗氧化酶的活性.
    本课题组吉晋芳等( 2008) 通过测定SOD、CAT、GPx 等抗氧化酶的活性发现,LMWC 对镉引起的长
江华溪蟹组织器官氧化损伤有一定的防护作用. MT具有重金属解毒功能. 那么,LMWC 对MT mRNA 转
录水平的作用又如何? 鉴于此,本实验采用实时荧光定量PCR 法( Paul-Pont et al. ,2010) ,研究了镉胁迫下长江华溪蟹( Sinopotamon yangtsekiense) 4 种组织( 肝胰腺、鳃、肌肉和心脏) MT 在mRNA 转录水平的变化,以及在镉和LMWC 联合作用下表达的变化规律,从而阐明机体防护镉污染的机理与LMWC的防护机制,为LMWC 作为重金属毒性的防护剂提供科学依据.
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