电化学液相色谱分析庆大霉素的方法

闫广伟 | -> | 1675| 7| 0.2378MB |硫酸庆大霉素,电化学液相色谱仪,紫外检测器高效液相色谱仪

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摘 要:采用电化学检测器液相色谱测定硫酸庆大霉素组分及杂质,无需采用衍生化反应,可以直接进样,且检测灵敏度高、分离效果好。该方法在所测定的范围内具有良好的线性(相关系数r > 0. 99) ,重复测定及耐用性的相对标准偏差组分均小于2% ,杂质均小于10%; C2a组分的最小检测浓度为0. 002mg/ml。结果表明该方法测定硫酸庆大霉素组分及杂质是一种简便、准确的分析方法。
    庆大霉素( Gentamicin) 是在1963 年发现的,1966年开始使用在临床,我国于1965年由中国科
学院福建微生物研究所从福州湖泥内分离得到产生菌———小单孢菌(Micromonos pora) ,经研究试制成功后并投入生产。庆大霉素是一种杀菌力较强的广谱抗生素,对多种革兰氏阴性菌和阳性菌有较强的抗菌作用。特别对绿脓杆菌和金色葡萄球菌有良好的抗菌作用。
    庆大霉素的化学结构属于氨基糖苷类抗生素,它是一族由小单孢菌产生的四个庆大霉素主要组分
C1、C2、C1a、C2a及许多庆大霉素次要组分组成的多组分抗生素。几个次要组分如西梭霉素、庆大霉素C2b、加纳米星、庆大霉素B,还有C1、C2、C2a的前体,因此色谱分离就成了重要的分析手段。最早的检测方法有纸色谱,薄层色谱,离子交换液相色谱,反相液相色谱和毛细管电泳等。由于庆大霉素在紫外没有吸收峰,因此HPLC方法结合了柱前衍生来检测各组分,British Pharmacopoeia 2000,Europe Pharmacopoeia4. 0,United States of America Pharmacopoeia 28,中华人民共和国药典2000都是以HPLC方法结合了柱前衍生来检测庆大霉素各组分的。在这个系统中西梭霉素、庆大霉素C2b、加纳米星、庆大霉素B都没有得到很好的分离。庆大霉素C2b的出峰位置在C1 的上升处,在C1 区域没有很好的分离;西梭霉素的出峰位置在C2a和C2 相连处,也没有得到很好的分离。
    由于庆大霉素中有电活性分子, Europe Pharmacopoeia 4. 5版采用脉冲电化学检测器( PED) ,使庆大霉素在外加电压的作用下,在检测池内产生电解反应,即在工作电极表面进行氧化还原反应,产生不同的电流,从而检测器能检测庆大霉素的各组分。
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