高效阴离子交换色谱_脉冲安培检测法定量测定低聚木糖样品中的低聚木糖

高宁虹 | -> | 939| 2| 1047.224MB |高效阴离子交换色谱,脉冲安培检测,低聚木糖

摘要: 建立了低聚木糖样品中的木二糖至木六糖等低聚木糖的高效阴离子交换色谱定量测定方法, 并根据低聚木糖的聚合度与色谱保留时间的线性关系, 对木七糖和木八糖的保留时间进行预测。采用CarboPacTM PA200阴离子交换柱( 3 mm 􀀁 250 mm), 以醋酸钠和氢氧化钠为淋洗液进行二元梯度洗脱, 脉冲安培法进行检测。结果表明,木二糖至木六糖在0􀀁804~ 8􀀁 607mg/L质量浓度范围内的线性关系良好, 检出限为0􀀁064~ 0􀀁111 mg /L, 定量限为0􀀁 214~ 0􀀁 371 mg /L。将该方法用于低聚木糖产品的检测, 3个添加水平的加标回收率为84. 29% ~ 118. 19%, 相对标准偏差(n = 3)为0. 44% ~ 14. 87%。结果表明该方法适用于低聚木糖产品中有效成分的快速、高效分离和定量测定。

低聚木糖( xylo􀀁oligosaccharide, XOS)是由2~ 8个木糖分子以􀀁􀀁1, 4木糖苷键连接而成的功能性低聚糖, 具有独特的免疫增强和保健促生功效, 是目前效价比最高的双歧因子之一。现已成功地应用于食品和饲料添加剂行业, 成为当前研发的热点, 市场发展空间巨大[ 1]。
􀀁 􀀁目前低聚木糖的分析和检测主要采用高效液相色谱法(HPLC)[ 2- 4 ]。由于低聚木糖产品均为聚合度相近的各种低聚糖组分的混合物, 采用普通的HPLC尚不能高效分离这些糖组分[ 2] , 因而难以对低聚木糖进行准确的定量测定, 从而制约了低聚木糖产品的质量控制、品质评定及工艺技术优化。高效阴离子交换色谱􀀁脉冲安培法(HPAEC􀀁PAD)利用糖类物质在强碱性介质中可以发生酸性解离的原理, 采用高效阴离子交换色谱柱分离糖类, 利用糖分子结构中的羟基在金电极表面发生氧化还原反应时产生的电流实现检测[ 5 ]。与普通的HPLC 相比,HPAEC可利用不同相对分子质量的低聚糖之间羟基解离度的细微差异实现它们的精确分离, 具有操作方便、针对性强、灵敏高和应用范围广等优点, 适用于低聚糖的定性分析和定量检测[ 6] , 并已成功用于菊糖等低聚糖的分析[ 7- 9]。尽管Swennen等[ 10]采用CarboPacTMPA100阴离子交换柱实现了对低聚木糖组分以及阿拉伯糖基低聚木糖组分的分离,但未对分离条件做进一步的优化, 且未建立定量分析方法。本文在该工作的基础上, 采用分离效果更好的CarboPacTM PA200 阴离子交换柱, 利用HPAEC􀀁PAD装置, 实现了低聚木糖产品中各组分的高效、快速分离, 并建立了相应的定量测定方法。

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