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HPLC_RI法快速准确测定大豆磷脂酰胆碱含量

李丽华 | -> | 1422| 10| 0.25853MB |磷脂酰胆碱,高效液相色谱,示差折光检测,紫外检测

李丽华 李丽华 | 文档量 |浏览量12874

摘要: 用HPLC- RI法和HPLC- UV法对大豆卵磷脂样品中的磷脂酰胆碱含量进行分析, 并与二维TLC- P法
(AOCSJa7 - 86) 作比较。以Waters Spherisorb S5W(5μm Silica) 4. 6 ×250 mm硅胶柱为固定相, 正己烷- 异丙醇-水(体积比1 ∶4 ∶1) 为流动相。色谱条件: 流速0. 8 mL ·min - 1 , 进样量10μL , 柱温35 ℃, RI 检测器温度35℃。由外标法得出其中磷脂酰胆碱的含量, 分别采用大豆磷脂酰胆碱标样和蛋黄磷脂酰胆碱标样作为外标物。结果表明HPLC- RI法受标样来源影响小, 分析结果准确, 分析过程简便、快速, 适合作为常规分析方法。
    卵磷脂从广义上讲是指包含磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine , 简称PC) 、磷脂酰乙醇胺(phosphotidylethanolamine, 简称PE) 、肌醇磷脂(phosphatidylinositol , 简称PI) 和溶血磷脂酰胆碱(lysophosphatidylcholine , 简称LPC) 等在内的丙酮不溶磷脂, 而狭义的卵磷脂就是指磷脂酰胆碱PC , 是由甘油、胆碱、磷酸、脂肪酸组成的一类含磷脂类物质[ 1 ]。
    磷脂酰胆碱具有亲水和疏水双重性, 是一类天然的表面活性剂, 具有重要的生理功能和乳化性
能, 在食品、保健品和医药等行业中有重要的用途。准确分析卵磷脂样品中PC 的含量是一个关键问题。但是, 由于磷脂酰胆碱实际上是混合物, 而不是化合物, 其组成随原料油脂中的脂肪酸组成而变化, 给准确分析带来了很大困难。
    卵磷脂分析方法很多, 传统的薄层色谱测磷( TLC - P) 法是广泛被接受的定量分析方法。被美国油脂化学协会(AOCS) 收录为标准方法的二维TLC - P 法是一种更准确的定量分析磷脂的方[2 ]。这种方法是在分离后收集各种磷脂, 测定磷含量, 再按照各类磷脂的平均相对分子质量计算出它们的
含量。但是这种方法步骤较烦琐, 对操作技术要求较高。另外, 如果有很多样品, 定量分析需要很
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