仿刺参水溶性海参皂苷的分离纯化及其抑瘤活性研究

崔艳红 | -> | 593| 0| 1.020915MB |水溶性海参皂苷,抑瘤活性,细胞凋亡,大孔树脂柱,硅胶柱,凝胶柱色谱

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摘要: 为了获得具有显著抑瘤活性的水溶性海参皂苷样品, 利用大孔树脂柱、硅胶柱和葡聚糖凝胶柱对水溶性海参皂苷进行了分离纯化, 并对其体内外抑瘤活性和诱导肿瘤细胞凋亡进行了检测。研究结果显示, 大孔树脂柱的70%乙醇洗脱组分以及硅胶柱色谱的部分纯化组分 (pSC-2 和pSC-3) 对HeLa 细胞、A-549 肺癌细胞、SGC-7901 胃癌细胞和Bel-7402 肝癌细胞均具有显著的抑瘤活性; 经过葡聚糖凝胶柱色谱, 获得了纯度均在99.6%以上、具有三萜类皂苷性质的SC-2 和SC-3 纯化样品, 发现SC-2 纯化样品不仅能浓度和时间依赖性地抑制HeLa 细胞的体外增殖, 还能剂量依赖性地抑制S180 实体瘤的体内生长, 提高荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数。细胞凋亡检测结果显示, SC-2 纯化样品可剂量依赖性地诱导HeLa 细胞凋亡, SC-2 纯化样品 (10 和50 mg·L−1) 处理12 h 的HeLa 细胞均出现了DNA 片段化。可见, 水溶性海参皂苷SC-2 纯化样品具有显著的抑瘤活性, 其机制可能是通过诱导肿瘤细胞发生凋亡来实现的。
    海 参 皂 苷 (holothurian glycosides) 又称海参素(holothurin), 是棘皮动物海参体内含量丰富的主要次生代谢产物, 一般为三萜皂苷成分, 它不仅对海参的生存(防卫、捕食等)具有重要意义[1, 2], 而且还具有抗肿瘤[3]、抗真菌[4]、细胞毒[5~7]、溶血[8]等广泛的药理活性。
    对海参皂苷抗肿瘤活性的研究开始于1990 年,现已从10 余种海参中分离纯化出海参皂苷, 发现其
对小鼠白血病细胞、人胃癌细胞、肠癌细胞、肝癌细胞、肺癌细胞、肾癌细胞、口腔上皮癌细胞、鼻咽癌细胞、黑色素瘤细胞、乳腺癌细胞、卵巢癌细胞、前列腺癌细胞和HeLa 细胞等多种癌细胞具有显著的抑瘤活性[9~13]。从阿氏辐肛参 (Actinopyga agassizi) 分离纯化出的海参皂苷, 还可显著抑制小鼠肉瘤S180 和Krebs-2 腹水瘤的体内生长[7, 14], 进一步证明海参皂苷是一类很有前景的抗肿瘤先导化合物。
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