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关键词：
密蒙花,总黄酮,抗氧化活性
发表时间：
2012-02-16 14:23:05
毛细管电泳分离_激光诱导荧光检测血清中的巴氯芬
李丽文 | -> | 912| 2| 0.278264MB |巴氯芬,毛细管电泳分离-激光诱导荧光法,6-氧-(N-琥珀酰亚胺乙酸酯)-9-( 2′-甲氧羰基)荧光素,衍生
摘 要 首次将新合成的柱前衍生试剂6-氧-( N -琥珀酰亚胺乙酸酯) -9-( 2′-甲氧羰基) 荧光素( SAMF) 用于巴氯芬( Baclofen) 的衍生标记, 并采用毛细管电泳分离-激光诱导荧光( CE-LIF) 法分离检测衍生物。研究表明, 在磷酸盐缓冲溶液( pH= 7. 5) 介质中, 30℃下10min 即可完成衍生反应。反应物在pH 5. 6, 35mmol·L- 1的磷酸盐缓冲溶液中12min 内达到分离, 检出限为6×10- 10mol·L- 1。本法用于血清中巴氯芬的分析测定, 回收率为95. 8%—101. 0%。
巴氯芬作为骨骼肌松弛药用于临床, 还具有镇咳、抗癫痫等作用, 其化学结构类似于-氨基丁酸。至今测定生物流体中巴氯芬的文献仍然较少。因此, 研究新的测定巴氯芬的有效的分析方法具
有重要的意义。
目前检测巴氯芬的方法主要有气相色谱法[ 1] 、高效液相色谱法[ 2] 、毛细管电泳法[ 3] 等。其中毛细管电泳-激光诱导荧光法是一种高效、快速、灵敏、仪器简单、耗费样品量少, 操作成本低的分离检测方法。
由于巴氯芬本身不发荧光, 且仅在= 220nm 处有紫外吸收, 采用直接检测的分析方法不能得
到较高的灵敏度。目前, 已报道用于巴氯芬的衍生试剂主要有2, 3, 4, 6-乙酰基--D-吡喃葡萄糖基
异硫氰酸酯( GITC) [ 2] , 2, 3-萘基二缩醛( NDA) [ 4] 等。然而, GITC 的衍生产物没有荧光, 须用紫外-可见检测, 灵敏度不高。NDA 是标记胺类化合物的最常用的荧光衍生试剂之一。它与胺类化合
物反应温和, 衍生产物稳定, 灵敏度较高, 然而该试剂须在氰离子的存在下与一级胺反应, 具有较强
的生物毒性。因此, 选择性能优良的荧光衍生试剂用于巴氯芬的分析测定具有重要的意义。
6-氧-( N -琥珀酰亚胺乙酸酯) -9-( 2′-甲氧羰基) 荧光素( SAMF, 图1) 是本实验室合成的一种新型的性能优良的荧光衍生试剂。它具有衍生反应迅速、光稳定性好、荧光强度受pH 值影响较小等
优点, 已成功用于脂肪胺[ 5] 等胺类化合物的研究。鉴于SAMF 优良的衍生和色谱性能, 本研究将它
应用于巴氯芬的分析测定。
有重要的意义。
目前检测巴氯芬的方法主要有气相色谱法[ 1] 、高效液相色谱法[ 2] 、毛细管电泳法[ 3] 等。其中毛细管电泳-激光诱导荧光法是一种高效、快速、灵敏、仪器简单、耗费样品量少, 操作成本低的分离检测方法。
由于巴氯芬本身不发荧光, 且仅在= 220nm 处有紫外吸收, 采用直接检测的分析方法不能得
到较高的灵敏度。目前, 已报道用于巴氯芬的衍生试剂主要有2, 3, 4, 6-乙酰基--D-吡喃葡萄糖基
异硫氰酸酯( GITC) [ 2] , 2, 3-萘基二缩醛( NDA) [ 4] 等。然而, GITC 的衍生产物没有荧光, 须用紫外-可见检测, 灵敏度不高。NDA 是标记胺类化合物的最常用的荧光衍生试剂之一。它与胺类化合
物反应温和, 衍生产物稳定, 灵敏度较高, 然而该试剂须在氰离子的存在下与一级胺反应, 具有较强
的生物毒性。因此, 选择性能优良的荧光衍生试剂用于巴氯芬的分析测定具有重要的意义。
6-氧-( N -琥珀酰亚胺乙酸酯) -9-( 2′-甲氧羰基) 荧光素( SAMF, 图1) 是本实验室合成的一种新型的性能优良的荧光衍生试剂。它具有衍生反应迅速、光稳定性好、荧光强度受pH 值影响较小等
优点, 已成功用于脂肪胺[ 5] 等胺类化合物的研究。鉴于SAMF 优良的衍生和色谱性能, 本研究将它
应用于巴氯芬的分析测定。
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