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关键词：
密蒙花,总黄酮,抗氧化活性
发表时间：
2012-02-16 14:23:05
摘 要 提出了一种用于血清微量丙酮酸( PA) 测定的酶荧光毛细分析法( P-LE-FCA) 。优选的测定条件为: 乳酸脱氢酶和还原型辅酶I 的浓度分别为100U/ L 和60mol/ L, 反应时间5m in。测定PA 的线性范围4—80m ol/ L, 检出限0. 73mol/ L, RSD< 1. 3%。血清共存物质对PA 测定无明显干扰。使用该方法对血清PA 进行测定, 其回收率在93. 0%—106. 5%之间; 结果与常规紫外分光光度法一致。本方法的样品预处理过程简单、省时, 省试剂, 灵敏度高, 重现性好。
丙酮酸( Pyruvic acid, PA ) 是糖酵解过程的最终产物以及糖类、蛋白质和脂肪代谢的中间产
物[ 1] , 可以进入三酸循环进行有氧代谢或被还原转化为乳酸。人血清PA 正常值为40—100mol/ L[ 2] , 当血清PA 含量出现异常, 就表明机体可能患有某种疾病, 尤其是代谢性酸中毒[ 3] 。在临床检验中, 检查血清中丙酮酸可诊断病人是否患有糖尿病、维生素B1 缺乏症、脓血症、尿毒症、酸毒症[ 4] 等疾病。因此, 血清中PA 的测定可以为临床医学检验和生化分析中的新陈代谢及反应过程提供重要信息。
目前, 测定血清中PA 主要有气相色谱法[ 5] 、高效液相色谱法[ 6] 、离子交换色谱法[ 7] 、毛细管电泳法[ 8] 等。这些方法仪器昂贵, 样品前处理复杂, 不适用于快速临床检验。本研究结合酶法和荧光毛细分析法( Fluorescence capillary analysis, FCA) [ 9] , 建立了一种测定血清微量PA 含量的酶荧光毛细分析法( P-LE-FCA) 。该方法利用普通医用毛细管和毛细管精密定位座代替常规荧光杯, 使每次反应液用量降到18L, 和常规荧光法相比节约了99. 5% 测定成本, 而且血清需用量少, 操作简便快速, 灵敏高, 能够广泛推广使用。
物[ 1] , 可以进入三酸循环进行有氧代谢或被还原转化为乳酸。人血清PA 正常值为40—100mol/ L[ 2] , 当血清PA 含量出现异常, 就表明机体可能患有某种疾病, 尤其是代谢性酸中毒[ 3] 。在临床检验中, 检查血清中丙酮酸可诊断病人是否患有糖尿病、维生素B1 缺乏症、脓血症、尿毒症、酸毒症[ 4] 等疾病。因此, 血清中PA 的测定可以为临床医学检验和生化分析中的新陈代谢及反应过程提供重要信息。
目前, 测定血清中PA 主要有气相色谱法[ 5] 、高效液相色谱法[ 6] 、离子交换色谱法[ 7] 、毛细管电泳法[ 8] 等。这些方法仪器昂贵, 样品前处理复杂, 不适用于快速临床检验。本研究结合酶法和荧光毛细分析法( Fluorescence capillary analysis, FCA) [ 9] , 建立了一种测定血清微量PA 含量的酶荧光毛细分析法( P-LE-FCA) 。该方法利用普通医用毛细管和毛细管精密定位座代替常规荧光杯, 使每次反应液用量降到18L, 和常规荧光法相比节约了99. 5% 测定成本, 而且血清需用量少, 操作简便快速, 灵敏高, 能够广泛推广使用。
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