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关键词：
浓香型大曲酒,丢糟,TH—AADY,糖化酶,应用
发表时间：
2013-01-23 15:20:28
PEG_NH_4_2SO_4双水相体系提取和纯化糖化酶
李晨 | -> | 1181| 0| 0.119806MB |糖化酶,PEG_NH_4_2SO_4,双水相体系,提取,纯化
摘要： 用PEG_NH_4_2SO_4双水相体系提取、纯化糖化酶，研究了影响体系分配系数、回收率和纯化因子的因素，从而确定了萃取糖化酶的最佳条件。在!>?@为6;5C，!（:BC） 5-DC为6;6F条件下，分配系数最小，达6;655，回收率为<E;9 G。
双水相萃取是利用双水相体系如聚乙二醇（>?@）A 葡聚糖（]/K）体系、>?@A 无机盐等体系的水溶液形成互不相溶的两相，通过选择合适的成相与分配条件，使酶、蛋白质及菌体等生物大分子在两相中有不同比例的分配，从而实现其纯化。由于葡聚糖价格较高，所以>?@A 无机盐系统应用更为广泛。
近年来，双水相萃取已经发展成为一种适合于大规模生产、经济简便、快速高效的分离纯化技术，现已被广泛应用于生物化学、细胞生物学和生物化工等领域的产品分离和提取，在蛋白质、酶、核酸等生物大分子的分离纯化方面更是受到广泛重视。相对于传统溶剂萃取来说，双水相萃取最大的优势在于双水相体系可为生物活性物质提供一个温和的活性环境，因而可在萃取过程中保持生物物质的活性及构象，而且双水相萃取还有收率高、成本低、可连续化操作等优点^8_5‘。
双水相在分离细胞碎片和胞内酶方面显示了取代高速离心和膜分离的潜力。细胞悬浮液经过破碎机后，与>?@和无机盐在萃取器中混合，随后分相。通过选择合适的萃取组成和条件，可以使细胞碎片先分布到下相，目标蛋白富集到上相，离心除去细胞碎片，然后调节组成和条件，再使目标蛋白富集于下相，与无机盐分离。有文献报道，糖化酶在>?@A （:BC） 5-DC双水相体系中的分配，
讨论了>?@分子量、质量分数、ZB、酶浓度等对糖化酶分配系数和回收率的影响^7_C‘。本实验在此基础上，讨论了在>?@C666和（:BC）5-DC的不同浓度下糖化酶在两相间的转移，进一步分析了>?@质量分数，自然分相时间对分配系数和回收率的影响，并分析评价了纯化因子和物料衡算。
近年来，双水相萃取已经发展成为一种适合于大规模生产、经济简便、快速高效的分离纯化技术，现已被广泛应用于生物化学、细胞生物学和生物化工等领域的产品分离和提取，在蛋白质、酶、核酸等生物大分子的分离纯化方面更是受到广泛重视。相对于传统溶剂萃取来说，双水相萃取最大的优势在于双水相体系可为生物活性物质提供一个温和的活性环境，因而可在萃取过程中保持生物物质的活性及构象，而且双水相萃取还有收率高、成本低、可连续化操作等优点^8_5‘。
双水相在分离细胞碎片和胞内酶方面显示了取代高速离心和膜分离的潜力。细胞悬浮液经过破碎机后，与>?@和无机盐在萃取器中混合，随后分相。通过选择合适的萃取组成和条件，可以使细胞碎片先分布到下相，目标蛋白富集到上相，离心除去细胞碎片，然后调节组成和条件，再使目标蛋白富集于下相，与无机盐分离。有文献报道，糖化酶在>?@A （:BC） 5-DC双水相体系中的分配，
讨论了>?@分子量、质量分数、ZB、酶浓度等对糖化酶分配系数和回收率的影响^7_C‘。本实验在此基础上，讨论了在>?@C666和（:BC）5-DC的不同浓度下糖化酶在两相间的转移，进一步分析了>?@质量分数，自然分相时间对分配系数和回收率的影响，并分析评价了纯化因子和物料衡算。
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