PCR_DGGE技术及其在食品行业中的应用

张庆涵 | -> | 1086| 1| 0.154146MB |PCR-DGGE,微生物群落动态性,食品行业,应用

张庆涵 张庆涵 | 文档量 |浏览量8284

摘要: 现代分子生物学技术PCR-DGGE 是一种分析微生物群落的有效工具, 可以用于研究生态系统中微生物多样性和群落动态性。简要介绍了PCR-DGGE 技术原理及其在食品行业中微生物生态学领域的应用。
    变性梯度凝胶电泳(Denaturing Gradient Gel Electrophoresis,DGGE)最早是由Fisher 和Lerman[1] 于1979年发明并用于检测DNA 突变的技术,1993 年Muyzer[2]首次将该技术用于微生物生态学的研究,并证实了这种技术在研究自然界微生物群落的遗传多样性和种群差异方面具有明显的优越性。在近十年的时间已被广泛应用于各种环境微生物生态的研究,如高温热泉[3]、湖泊[4]、长江[5]、海洋[6]、根系[7]、土壤[8]和沙丘[9]等。
    DGGE 技术检测核酸序列是通过不同序列的DNA片段在各自相应的变性剂浓度下变性,发生空间构型的变化,导致电泳速度的急剧下降,最后在其相应的变性剂梯度位置停滞,经过染色后可以在凝胶上呈现为分散的条带。该技术可以分辨具有相同大小片段的序列差异,可以用于检测单一碱基的变化、微生物群落遗传多样性以及PCR 扩增DNA 片段的多态性。
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