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关键词：
自制,酸奶,乳脂,共轭,油酸,免疫,调节作用,影响,
发表时间：
2011-03-01 15:10:30
摘 要：血管紧张素转化酶(angiotensin-converting enzyme，ACE)抑制剂是目前用于治疗高血压的重要药物。本实验采用胃蛋白酶(pepsin)和胰蛋白酶(trypsin)组合酶解胶原蛋白制备水解液。使用1kD超滤膜对水解液进行超滤，超滤液采用葡聚糖凝胶Sephadex G-15 凝胶过滤层析得到多种组分。各组分经酶活力和蛋白浓度测定，筛选出有较高A C E 抑制率的两个样品。继续使用反相高效液相色谱进一步分离筛选出样品，对分离出的不同组分进行蛋白浓度和抑制率测定，通过分析实验数据，筛选出具有最高活性组分。最终样品经脱盐和冷冻干燥后进行高抑制活性的血管紧张素转化酶抑制肽的分子量的测定。
关键词：血管紧张素转化酶；抑制肽；凝胶过滤层析；反相高效液相色谱；高血压
关键词：血管紧张素转化酶；抑制肽；凝胶过滤层析；反相高效液相色谱；高血压
高血压是最常见的心血管病，是全球范围内的重大公共卫生问题。血管紧张素转化酶(angiotensin-convertingenzyme，ACE)在血压调节过程中起关键作用，在人体内通过肾素- 血管紧张素系统(renin-angiotensinsystem，简称RAS)和激肽释放酶-肽酶系统(kallikreinkininsystem，简称KKS )参与血压的调节[1-3]。RAS 是升压系统，通过ACE 使血管紧张素Ⅰ(angiotensin Ⅰ，A n g Ⅰ) 从其C 末端去掉His-Leu 生成血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ，Ang Ⅱ)，Ang Ⅱ是一种强效的血管收缩剂，它作用于小动脉，使血管平滑肌收缩，迅速引起升压效应；而K K S 是降压系统，又称抗高压因子，其中舒缓激肽(bradykinin)是降压物质。ACE 在该系统中又作为肽激酶Ⅱ，使具有降压作用的舒缓激肽失去C 末端的Phe-Arg 或Ser-Pro，从而使之降解成为失活片断，也引起血压升高。由此可见，ACE 通过作用RAS 和KKS系统，共同使血压升高。
不难发现，如果找出ACE 抑制剂，从理论上来说，可以有效地对高血压进行治疗。1965 年Ferreira 从巴西蝮蛇(Bathrops jararaca)蛇毒里分离出多肽物质，能增强舒缓激肽的舒张血管作用，称为“缓激肽增强肽(bradykinin-potentiating peptide)”[ 4]。后来发现此肽类也能抑制A C E 而具有降压作用，这是最早发现的具有A C E 抑制活性的天然多肽。随着了解的深入，食物蛋白被越来越多的列入研究范围，并且能够从中获得许多具有较高抑制活性的多肽，研究较为深入的有：酪蛋白(casein)[5]、乳清蛋白(whey protein)[6]、鱼蛋白(fishprotein)[7]、大豆蛋白(soybean protein)[8]、动物明胶(animal gelatin)[9]等。
不难发现，如果找出ACE 抑制剂，从理论上来说，可以有效地对高血压进行治疗。1965 年Ferreira 从巴西蝮蛇(Bathrops jararaca)蛇毒里分离出多肽物质，能增强舒缓激肽的舒张血管作用，称为“缓激肽增强肽(bradykinin-potentiating peptide)”[ 4]。后来发现此肽类也能抑制A C E 而具有降压作用，这是最早发现的具有A C E 抑制活性的天然多肽。随着了解的深入，食物蛋白被越来越多的列入研究范围，并且能够从中获得许多具有较高抑制活性的多肽，研究较为深入的有：酪蛋白(casein)[5]、乳清蛋白(whey protein)[6]、鱼蛋白(fishprotein)[7]、大豆蛋白(soybean protein)[8]、动物明胶(animal gelatin)[9]等。
胶原蛋白是很多脊椎动物和无脊椎动物体内含量最丰富的蛋白质，能使腱、软骨、骨、牙、皮和血管等结缔组织具有机械强度。胶原是哺乳动物体内含量最多的蛋白质，占体内蛋白质总量的25%～30%[10]。一些研究表明，很多从食物蛋白中获得的非常有效的ACE 抑制肽在多肽链的C-端都是Pro。如Pro-Leu-Ile-Tyr-Pro[5]、Phe-Phe-Gly-Arg-Cys-Val-Ser-Pro[11]、Leu-Tyr-Pro[12]、Leu-Arg-Pro[13]等。由于胶原蛋白中Pro(包括Hyp)含量高达2 5 % ，远远高于其它常见的蛋白质，所以，理论上来说，经过适当的酶解，胶原蛋白水解得到具有高抑制活性的多肽几率会非常的大。
另外，世界上对胶原蛋白制备降血压肽的研究正处于起步阶段，通过本课题的研究，有助于加深对胶原蛋白酶解的了解，超滤、凝胶过滤、高效液相色谱等分离纯化条件的确定和操作方法也可为胶原蛋白水解产生降血压肽的工业化生产奠定基础。
另外，世界上对胶原蛋白制备降血压肽的研究正处于起步阶段，通过本课题的研究，有助于加深对胶原蛋白酶解的了解，超滤、凝胶过滤、高效液相色谱等分离纯化条件的确定和操作方法也可为胶原蛋白水解产生降血压肽的工业化生产奠定基础。
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