胶束电动毛细管色谱间接紫外光检测法分离胆汁酸

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摘 要:利用间接紫外光检测法在254 nm 进行胆汁酸胶束电动毛细管色谱分离的研究。在对氨基苯磺酸为背景电解质和十二烷基硫酸钠作胶束的体系中, 加入高浓度的尿素, 有效地改善了两类胆汁酸5 组份的分离度, 在优化分离缓冲体系10 mmolPL 对氨基苯磺酸- 5 mmolPL 硼砂- 30 mmolPL SDS - 7 molPL 尿素-10 %乙醇(pH 715) 中, 13 min 内获得基线分离, 分离效率为814 ×104~111×105 。所建立的方法无需衍生化处理, 为胆汁酸的分离提供了新的通用的方法。
关键词:胶束电动毛细管色谱; 间接紫外光检测; 胆汁酸
    胆汁酸(BA) 是中药动物胆汁中所含的主要活性成份, 属于一类疏水性较强而无光活性(254
nm) 的甾体化合物, 为体内重要的表面活性剂[1 ] 。其分析方法主要有薄层扫描法(TLC) [2 ] 、气相色谱法(GC) [3 ] 和高效液相色谱法(HPLC) [4 ,5 ] 等, 这些方法通常只用于单一胆汁酸的分离, 试剂消耗较大, 需较严格预处理。毛细管电泳(CE) 是生物活性物质的有效分离工具[6~10 ] , 而间接紫外光检测则广泛地应用于非光活性物质的检测, 且无需衍生化处理, 使检测方法简便而快速, 并减少了样品受污染的可能[8 ,11 ] 。基于胆汁酸的非光活性(254nm) 及其强疏水性的特点[1 ,4 ] , 本文利用对氨基苯磺酸(PABS) 为背景电解质, 进行两类5 组份胆汁
酸胶束电动毛细管色谱(MECC) 分离及其间接紫外光检测的研究, 包括3 种游离胆汁酸和2 种结合
胆汁酸, 即: 胆酸(CA) 、熊脱氧胆酸(UDOC) 、猪脱氧胆酸(HDOC) 和牛磺胆酸(TC) 、牛磺熊脱氧胆酸(TUDOC) 。在十二烷基硫酸钠(SDS) 作胶束的体系中加入高浓度的尿素, 有效地改善其分离度,在优化分离缓冲体系中, 13 min 内获得基线分离。
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