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关键词：
黄芪,三七,化学成分,高效液相色谱,质谱,生产工艺
发表时间：
2013-06-19 15:41:52
摘要目的: 建立高效液相色谱－ 电化学法测定小鼠血浆中异丙肾上腺素浓度，为研究其在小鼠体内药代动力学过程提供检测手段。方法: 采用SymmetryShield C18柱( 4. 6 mm × 250 mm， 5. 0 μm) ，流动相为含0. 05 mol·L － 1 柠檬酸， 0. 05 mol·L － 1 无水乙酸钠， 0. 3 mmol·L － 1 EDTA － Na2， 1. 0mmol·L－1IPR －B8离子对试剂， 0. 06 mmol·L － 1 二正丁胺， 1. 6% 甲醇水溶液。流速: 0. 9 mL·min － 1 ，柱温25 ℃。以3，4－ 二羟基苄胺为内标; 用电化学检测器测定，检测电压: 700 mV。测定小鼠皮下注射异丙肾上腺素( 0. 75 mg·kg － 1 ) 后不同时间的血浆药物浓度，用3P97 软件拟合计算相关药动学参数。结果: IP 在浓度范围为0. 5 ～ 294. 0 ng·mL － 1 内，线性关系良好( r = 0. 9998，n = 7) 。平均提取回收率为85. 8%，平均回收率为100. 9%，日内及日间RSD 均小于3. 9%( n = 5) 。最低检测限为0. 08 ng·mL － 1 ( S /N≥3) 。相关药动学参数为AUC0 － t = 2424. 76 min·ng·mL － 1 ，Vc = 2774 mL·kg － 1 ，Cl = 0. 309 mL·g － 1·min － 1 ，Ka = ( 0. 9817 ± 0. 174) min － 1 ，Lag Time = ( 0. 3076 ± 0. 0375) min。结论: 本法准确、快速、稳定、灵敏度高，可用于生物样品中异丙肾上腺素浓度测定。
异丙肾上腺素( isoproterenol， IP) 是临床使用已久的β 受体激动剂。近年有动物实验表明IP 可激活肝细胞β 受体，使肝脏细胞内合成cAMP 增多，从而间接促进肝间隙联结细胞间通讯( gap junctionalintercellular communication，GJIC) 的主要功能蛋白connexin43 ( Cx43 ) 组装成有GJIC 功能的GJ 构造［1］，从而在肝肿瘤早期通过调节GJIC 水平，抑制肝肿瘤发生。由于IP 所致副作用较多，为探索在较低副作用下IP 发挥调节GJIC 作用的最佳血药浓度水平，本文在文献［2］的基础上改进，建立高效液相色谱－ 电化学( HPLC － ECD) 法测定小鼠血浆中IP浓度，以适用于小鼠体内药动学研究。
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