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关键词：
家蝇,杀虫剂,乙酰胆碱酯酶,抗药性,酶动力学分析
发表时间：
2012-05-31 15:16:08
摘 要: 对家蝇残杀威抗性( RR)和敏感( SS )品系乙酰胆碱酯酶( acety lcho linesterase,AChE ) ( RR-和SS-AC hE )的生化特性研究后发现, RR-和SS-AChE 存在着明显的差异: 1) RR-和SS-AChE 最适反应温度分别为37e 和34e , 但最适pH 值均为7. 4; 2) AChE催化底物的能力不同, RR-AC hE
水解碘化硫代乙酰胆碱(ATC h)、碘化硫代丁酰胆碱( BTC h)、碘化硫代丙酰胆碱( PTCh)的活力高于SS-AC hE, 其相应的最大反应速率(Vmax )比分别是SS-AChE 的2. 22、1. 08和3. 41倍; 3)从双分子速率常数( bim o lecular constan,t K i)来看, RR-AC hE 对4种氨基甲酸酯类抑制剂(残杀威、克百威、甲萘威、灭多威)的敏感度分别是SS-AChE 的46. 77、28. 15、66. 15和15. 00倍, 对4种有机磷类抑制剂(马拉氧磷、甲胺磷、氧乐果和氧化三唑磷)的敏感度分别是7. 66、12. 13、3. 81和2. 25倍;4)上述抑制剂与RR-AChE 分子相互作用的亲和力常数(K a ) 均大于与SS-AChE 的值; 5) RRAChE 的磷酰化或氨基甲酰化常数(K 2 )值都低于SS-AC hE 的值。表明RR-AChE 的性质已发生变化。
水解碘化硫代乙酰胆碱(ATC h)、碘化硫代丁酰胆碱( BTC h)、碘化硫代丙酰胆碱( PTCh)的活力高于SS-AC hE, 其相应的最大反应速率(Vmax )比分别是SS-AChE 的2. 22、1. 08和3. 41倍; 3)从双分子速率常数( bim o lecular constan,t K i)来看, RR-AC hE 对4种氨基甲酸酯类抑制剂(残杀威、克百威、甲萘威、灭多威)的敏感度分别是SS-AChE 的46. 77、28. 15、66. 15和15. 00倍, 对4种有机磷类抑制剂(马拉氧磷、甲胺磷、氧乐果和氧化三唑磷)的敏感度分别是7. 66、12. 13、3. 81和2. 25倍;4)上述抑制剂与RR-AChE 分子相互作用的亲和力常数(K a ) 均大于与SS-AChE 的值; 5) RRAChE 的磷酰化或氨基甲酰化常数(K 2 )值都低于SS-AC hE 的值。表明RR-AChE 的性质已发生变化。
据报道, 家蝇对常用杀虫剂均已产生抗性[ 1] ,其中对有机磷( OP)和氨基甲酸酯类( CB ) 杀虫剂的主要抗性机理除了解毒酶活性增高外, 还有靶标酶) ) ) 乙酰胆碱酯酶( AChE, EC, 3. 1. 17) 敏感度降低[ 2, 3] 。在许多昆虫中已被证实靶标抗性与AC hE基因(a ce )突变有关[ 4] 。不少学者应用定点突变技术, 对不同突变组合的a ce 表达的AChE 蛋白的功能进行了研究, 进一步揭示了ace 不同位点的突变及其组合与抗性的关系[ 5~ 8] 。笔者曾对残杀威抗性( RR ) 和敏感( SS) 家蝇品系的抗性谱和抗性机理进行了研究, 并对这两个品系的a ce 基因进行了克隆和序列比较, 发现其抗性与4 个基因突变( V 261L、G 343A、F408Y 和D 422V )有关, 并对这些突变基因进行了表达和功能的研究[ 5, 9] , 但对RR 和SS品系的AC hE ( RR-和SS-AC hE )的生
化特性尚未进行详细研究, 也未见相关报道, 本文就这方面的研究结果报告如下。
化特性尚未进行详细研究, 也未见相关报道, 本文就这方面的研究结果报告如下。
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