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关键词：
蛇床子素,超临界CO2萃取,制备型高效液相色谱（PHPLC）,面积归一化
发表时间：
2012-02-28 15:35:46
摘要：目的优选超临界 CO2 萃取蛇床子中蛇床子素工艺，建立制备型高效液相色谱（PHPLC）分离纯化萃取物中蛇床子素的方法。方法以总萃取物得率和萃取物中蛇床子素的量为指标，选取温度、压力和提取次数3 个因素，按L9(34) 正交设计优选蛇床子素超临界CO2 萃取工艺。萃取物经甲醇超声溶解后，采用PHPLC 法，色谱柱为：Zorbax SB-C18 柱（250 mm×21.2 mm，7 μm），流动相为甲醇-水（70∶30），柱温为25 ℃，体积流量为15 mL/min，检测波长为322 nm，进样量为5 mL，收集蛇床子素馏份，经真空冷冻干燥得蛇床子素单体。结果最佳萃取工艺为：温度 50 ℃，压力25 MPa，提取3 次（每次1 h），PHPLC 法制备的蛇床子素用面积归一化法与外标法定量，质量分数为98.8%，1H-NMR 鉴定结构，与文献数据一致。结论超临界 CO2 萃取蛇床子中蛇床子素提取效果好，工艺简单可行，PHPLC 法制备高纯度蛇床子素，简便快捷，并适于大规模制备蛇床子素。
蛇床子素又名甲基欧芹酚（osthol），是从伞形科植物蛇床Cnidium monnieri (L.) Cusson 成熟果实中提取的香豆素。蛇床子素具有抗肿瘤、抗诱变、抗氧化，抑制阿霉素的心脏毒性等多种药理活性[1-6]。蛇床子中蛇床子素的量最高[7]。有关蛇床子素的提取方法，主要采用水煎、醇提等，操作较为繁琐，有效成分损失较大，超临界CO2 萃取蛇床子中蛇床子素产率高[8-9]。目前，蛇床子素的分离纯化方法主要是重结晶法、大孔树脂纯化法[10]，操作繁琐，制备量小。制备型高效液相色谱（PHPLC）已成为当今高效分离与纯化中药有效成分的重要技术手段，在制备高纯度生物活性物质时，操作简单，制备量大[11]。本实验以总萃取物得率及萃取物中蛇床子素的量为指标，选取对萃取影响较大的温度、压力和次数3 个因素，按L9(34) 正交设计优选蛇床子素超临界CO2 萃取工艺，建立PHPLC 分离、纯化超临界CO2 萃取物中蛇床子素的方法，为蛇床子素纯品的大规模制备提供实验依据。
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