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关键词：
板蓝根,抗病毒活性,神经氨酸酶,生物效价,品质评价
发表时间：
2012-07-16 15:42:05
摘要: 采用流感病毒神经氨酸酶 (NA) 体外活性荧光检测法测定板蓝根的NA 抑制生物活性, 并建立板蓝
根抗病毒生物效价检测方法。研究表明板蓝根具有抑制NA的活性, IC50 = (0.90 ± 0.20) mg·mL−1 (相当于生药), 其量效曲线形状与阳性对照药磷酸奥司他韦相似, 提示二者对NA 的抑制可能具有相同的作用方式。采用“质反应平行线”法设计和优化的板蓝根抗病毒生物效价检测方法, 重复性较好 (RSD = 5.78%), 实际样品检测结果均能通过可靠检验 (偏离直线P > 0.05、偏离平行P > 0.05)。研究结果表明, 所建立的生物效价检测方法可以作为板蓝根品质生物评价的方法之一。
根抗病毒生物效价检测方法。研究表明板蓝根具有抑制NA的活性, IC50 = (0.90 ± 0.20) mg·mL−1 (相当于生药), 其量效曲线形状与阳性对照药磷酸奥司他韦相似, 提示二者对NA 的抑制可能具有相同的作用方式。采用“质反应平行线”法设计和优化的板蓝根抗病毒生物效价检测方法, 重复性较好 (RSD = 5.78%), 实际样品检测结果均能通过可靠检验 (偏离直线P > 0.05、偏离平行P > 0.05)。研究结果表明, 所建立的生物效价检测方法可以作为板蓝根品质生物评价的方法之一。
板蓝根 (Radix Isatidis) 是常用中药, 用于治疗感染性疾病, 临床疗效确切, 尤其是抗流感病毒作用被认为是板蓝根的主要药理活性[1−6]。由于板蓝根化学成分复杂, 药效物质不明确, 对其质量控制, 现版药典[7]主要以指标性成分精氨酸的薄层检识为定性依据。但是精氨酸并不是板蓝根的主要药效成分, 也不是专属性成分, 因此精氨酸的检识对于板蓝根的质量控制并无太大意义。当前, 建立与药效相关的中药质量生物控制模式和方法已经成为中药质量控制研究和发展的趋势[8, 9]。优选和建立适宜的抗病毒效价检测方法用于板蓝根质量控制和品质评价, 可以体现板蓝根功效特点, 补充和完善以指标性成分检测为主的质控模式的不足。
底物荧光检测法 (FL-MU-NANA method) 是流感病毒神经氨酸酶 (NA) 活性体外检测方法之一。由
于NA 是影响流感病毒复制、感染和致病的关键酶,NA 抑制剂可以通过抑制NA 活性而有效地控制流感
症状和疾病的传播[10, 11], 因此近年来NA活性荧光检测法已发展为抗流感病毒药物 (包括植物药) 的筛选和活性评价的重要方法[12]。本文采用底物荧光法检测了板蓝根体外抑制NA 的生物活性, 并按照生物效价检测的要求设计和优化试验条件, 建立了基于流感病毒神经氨酸酶活性检测的板蓝根品质生物评价方法。
底物荧光检测法 (FL-MU-NANA method) 是流感病毒神经氨酸酶 (NA) 活性体外检测方法之一。由
于NA 是影响流感病毒复制、感染和致病的关键酶,NA 抑制剂可以通过抑制NA 活性而有效地控制流感
症状和疾病的传播[10, 11], 因此近年来NA活性荧光检测法已发展为抗流感病毒药物 (包括植物药) 的筛选和活性评价的重要方法[12]。本文采用底物荧光法检测了板蓝根体外抑制NA 的生物活性, 并按照生物效价检测的要求设计和优化试验条件, 建立了基于流感病毒神经氨酸酶活性检测的板蓝根品质生物评价方法。
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