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关键词：
麦汁,煮沸,凝固氮
发表时间：
2012-12-28 09:46:26
基于磁性碳纳米管修饰印刷电极的无酶型HIVp24安培免疫传感器
金敏 | -> | 859| 1| 0.489206MB |N,N'-双(2-羟基苯亚甲基)邻苯二胺合铜,丝网印刷电极,碳纳米管,Fe3O4
摘要在多壁碳纳米管( MWNTs) 表面固定Fe3O4( 核) /Au( 壳) 纳米微粒( GMP) ，使其具有超顺磁性，包被p24 抗体( anti p24) ，制得检测探针( MWNTs-GMP/anti p24) ; 在磁场作用下将此探针吸附于N，N'-双( 2-羟基苯亚甲基) 邻苯二胺合铜( CuRb) 修饰的碳基丝网印刷电极( SPCE| CuRb) 表面，制得了免疫传感电极( SPCE| CuRb /MWNTs-GMP/anti p24) 。当此电极在含p24 样本中于室温下温育15 min 后，随p24 浓度的增加在电极表面生成的免疫复合物增加，导致CuRb 对H2O2的催化还原电流下降。在含5 mmol /L H2O2的PBS( pH 7． 0) 中和－ 300 mV 下，催化还原电流降低值ΔIo
与p24 浓度在0． 6 ～ 160 μg /L 呈线性关系; 检出限为0． 32 μg /L ( 3σ) 。将其用于实际样品检测，结果与标准EILSA 方法一致。由于MWNTs-GMP/anti p24 具有超顺磁性，并可以显著提高电极比表面积及anti p24 负载量，而CuRb 代替易失活的HRP 酶，使得该传感器灵敏度和稳定性俱佳，电极表面可更新，可用于艾滋病人血清中p24 筛测。
与p24 浓度在0． 6 ～ 160 μg /L 呈线性关系; 检出限为0． 32 μg /L ( 3σ) 。将其用于实际样品检测，结果与标准EILSA 方法一致。由于MWNTs-GMP/anti p24 具有超顺磁性，并可以显著提高电极比表面积及anti p24 负载量，而CuRb 代替易失活的HRP 酶，使得该传感器灵敏度和稳定性俱佳，电极表面可更新，可用于艾滋病人血清中p24 筛测。
HIV 衣壳蛋白p24( 简称p24) 在艾滋病感染早期诊断中起着不可替代的作用［1］。其检测方法包括酶联免疫分析( ELISA) 、放射免疫分析( RIA) 、免疫荧光分析( IFA) ［2，3
］等。其中ELISA 法最常用，但灵敏度不高，“窗口期”长，假阳性率高。后两种方法灵敏可靠，但所需仪器昂贵，操作复杂，不适宜于基层医疗部门作p24 现场筛查。安培免疫传感器具有极高的灵敏度和特异性，适合于构建痕量p24 的快速检测技术，有望缩短艾滋病“窗口期”并降低检测成本［4，5］。但目前该类传感器在临床上应用还存在一些不足: 一是通常采用酶标抗体结合在电极表面，通过酶催化反应( 如HRP 酶对H2O2催化) 引起测试体系电信号变化进行测定。由于酶昂贵且固定于电极表面易失活，导致电极使用寿命降低; 二是当电极上的抗原/抗体发生结合后生成物很难除去，其表面无法更新，测定数次后需要重新修饰，费时繁琐; 三是常见的电极材料( 如金、玻碳等) 价格昂贵，制备成本高。N，N'-双( 2 羟基苯亚甲基) 邻苯二胺合铜［5］
( CuRb) 具有催化H2O2的特性，可替代HRP 酶。碳纳米管和纳米金常被用于固定抗原/抗体分子而制备生物探针，进而将其修饰到电极表面，可获得高灵敏度、检出时间显著缩短的安培免疫传感器［7 ～ 9］。闵丽根等［10］采用纳米金、多壁碳纳米管等合成了纳米复合物，用其固定癌胚抗原( CEA) 抗体制得了灵敏度和稳定性俱佳的CEA 传感器，但该类传感器仍无法实现更新。Fe3O4 /Au 组装型金磁纳米微粒( 简称GMP) 兼具Fe3O4的超顺磁性和胶体金的生物相容性，可用于抗体固定并易于实现磁性分离，近年来在生化分析中应用日渐广泛［11， 12］。如合成MWNTs /GMP 复合粒子( MWNTs-GMP) 并包被p24 抗体( anti p24) ，由此制备的“磁性碳纳米管探针”可方便地在外磁场作用下在电极表面吸附解吸，获得的免疫传感器可再生，由此可大大简化检测探针在电极上修饰过程。丝网印刷碳电极( SPCEs) 可批量生产，具有成本低、电极面积可控等突出优点，非常适合于构建廉价的一次性安培免疫传感器［13］。
］等。其中ELISA 法最常用，但灵敏度不高，“窗口期”长，假阳性率高。后两种方法灵敏可靠，但所需仪器昂贵，操作复杂，不适宜于基层医疗部门作p24 现场筛查。安培免疫传感器具有极高的灵敏度和特异性，适合于构建痕量p24 的快速检测技术，有望缩短艾滋病“窗口期”并降低检测成本［4，5］。但目前该类传感器在临床上应用还存在一些不足: 一是通常采用酶标抗体结合在电极表面，通过酶催化反应( 如HRP 酶对H2O2催化) 引起测试体系电信号变化进行测定。由于酶昂贵且固定于电极表面易失活，导致电极使用寿命降低; 二是当电极上的抗原/抗体发生结合后生成物很难除去，其表面无法更新，测定数次后需要重新修饰，费时繁琐; 三是常见的电极材料( 如金、玻碳等) 价格昂贵，制备成本高。N，N'-双( 2 羟基苯亚甲基) 邻苯二胺合铜［5］
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