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富锌培养对转金属硫蛋白侧耳菌丝生长和锌有机化程度的影响

豆建宏 | -> | 772| 0| 0.254386MB |金属硫蛋白,锌,蘑菇,转基因食品,保健食品,电感耦合等离子体-原子发射光谱

豆建宏 豆建宏 | 文档量 |浏览量17767

摘 要 金属硫蛋白(MT) 是一种低分子量、高巯基含量、能结合金属离子的功能性蛋白, 将MT 基因转入蘑菇, 可以获得具有重要生理功能的蘑菇以便为保健食品生产提供原料, 但对MT 蘑菇的富锌能力缺乏系统研究。文章报道了用电感耦合等离子体2原子发射光谱( ICP2AES) 法对富锌培养中的MT 侧耳( Pleurotusost reatus) 菌丝和未转化的侧耳菌丝(对照) 锌含量进行了测定, 分析了MT 侧耳菌丝的耐锌能力、富锌特性和锌有机化程度。结果发现转MT 侧耳在锌浓度0~112 mmol ·L - 1 范围内菌丝生长速度最高, 超过116mmol ·L - 1时菌丝生长开始受到抑制; 转MT 侧耳有较强的富锌能力, 当培养液中锌质量浓度为016~112mmol ·L - 1时, 菌丝体中锌含量在2156~27149 mg ·kg - 1 之间, 与锌添加量呈正相关, 且此浓度范围内菌丝体的生长情况良好; 在锌浓度为016 mmol ·L - 1的液体培养基中, 第7 d 转MT 侧耳菌丝锌有机化程度为8817 % , 比对照(8211 %) 显著提高(α= 0105) , 说明转入侧耳的MT 有利于无机锌向有机锌转化; 对在不同浓度下培养7 d 的两种菌丝测定发现, 其有机化程度差异不显著, 说明锌与菌体内的物质已经紧密结合形成有机锌复合物, 锌浓度对锌的吸收量有影响但对锌的有机化程度影响不大。
    金属硫蛋白(metallothionein , MT) 是一类低分子量、高巯基含量、能结合金属离子的性能独特的蛋白质, 具有多种生理功能[1 , 2 ] 。MT 对Cu 和Zn 等金属离子具有较强的亲和力, 因而MT 可充当这些金属的贮存蛋白[3 ] 。锌是人体不可缺少的微量元素, 是许多金属酶的组成成分或酶的激活因子, 它参与细胞基因的转录和复制, 促进激素与受体的特异结合, 能促进生长发育与组织再生, 增强智力发育, 尤其在有机化之后, 形成的金属一有机复合物对人体可产生各种特殊的生理功能和保健功能[4-6 ] 。但目前食物中强化锌的方法主要是添加锌的无机盐, 不仅吸收率低而且具有一定的毒性[7 ] , 因此, 有必要研究更适宜的补锌方法。
    侧耳( Pleurotus ost reatus) 是目前食用广泛的可食性真菌, 它除了含有丰富的营养物质之外还含有多种药用成分,许多国家已将其作为传统保健食品[8 ] 。我们实验室曾经以侧耳为材料, 将金属硫蛋白基因转入侧耳细胞, 得到MT 高效表达的菌株[9 ] 。本研究以此菌株和未转化菌株为材料, 用ICP2AES 法精确地测定锌了的含量, 研究转MT 侧耳的耐锌能力和富锌特性、锌的有机化程度, 为进一步利用转MT 侧耳研制安全、补锌效率高的优质保健食品奠定理论基础。
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