高速逆流色谱分离制备甘草中的甘草苷和芒柄花苷

摘要:应用高速逆流色谱分离制备甘草中的甘草苷和芒柄花苷。将甘草乙酸乙酯提取物经聚酰胺柱粗分后，30%乙醇洗脱物用高速逆流色谱进一步分离，所用两相溶剂系统为乙酸乙酯-水( 5∶ 5，v /v) ，转速850 rpm，流速2． 0 mL/min，检测波长254 nm，从50 mg30%乙醇洗脱物中得到甘草苷8． 7 mg、芒柄花苷4． 2 mg，纯度分别为99． 5%和97． 3%。所得产物的结构经核磁共振谱( NMR) 鉴定。利用该方法可以对甘草中的甘草苷和芒柄花苷进行快速的分离和纯化。

    甘草为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch． 、胀果甘草G． inflata Bat． 或光果甘草G． glabra L． 的干燥根及根茎，有补脾益气，清热解毒，祛痰止咳、缓急止痛，调和诸药等功效［1］。甘草中的黄酮类化合物具有较强的生物活性，近年发现该类化合物有抗氧化、抗炎、抗HlV、抗肿瘤等多种药理作用［2-5］。甘草苷和芒柄花苷是甘草的主要活性成分，其中甘草苷具有抗炎、抗皮肤肿瘤、祛除皮肤色斑和抗抑郁的作用［6，7］，芒柄花苷具有神经保护和抗氧化的作用［8］。因此，为了对甘草活性成分进行更深层次的药理药效研究，建立一种快速有效的分离制备方法具有重要意义。
    高速逆流色谱( HSCCC) 是近年来发展起来的一种液-液分配色谱新技术，其特点是被分离物质在两相液体中进行分配，不需要任何固相载体，克服了固相载体对样品吸附、损失、污染等缺点，具有适应面广、高效、快速、制备量大、费用低等特点，因而在天然产物的分离纯化领域得到了广泛的应用。目前，利用高速逆流色谱已从甘草中成功分离到多种黄酮类化合物，如甘草黄酮醇( licoflavonol) 、甘草素( liquiritigenin) 、芒柄花素( formononetin) 、甘草异黄
酮甲( licoisoflavone A) 、异甘草素( isoliquiritigenin) 、甘草查儿酮甲( licochalcone A) 等［9-11］。
    本实验先用聚酰胺树脂对甘草乙酸乙酯提取物进行处理，然后采用HSCCC 法对其进一步分离，得到了纯度均大于97%的甘草苷和芒柄花苷，为从甘草中制备甘草苷和芒柄花苷提供了一种新方法。