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免疫亲合柱_高效液相色谱检测中药中赭曲霉毒素

李天彪 | -> | 913| 3| 0.99935MB |赭曲霉毒素,免疫亲合柱,高效液相色谱,蒸发光散射,中药

李天彪 李天彪 | 文档量 |浏览量8257

摘 要:目的 建立免疫亲合柱(IAC)-高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ELSD)检测常用中药中赭曲霉毒素(OTA)的方法。方法 样品经甲醇-水(85∶15)振荡提取后,通过IAC 净化洗脱,HPLC 分离定量。结果 OTA 在2~200 ng/mL,呈良好的线性关系,r 为0.998 9;OTA 的最低检出限为0.5 ng/g;回收率为89.8%~94.6%,RSD 为3.1%~6.9%。结论 建立的IAC-HPLC 方法检测常用中药中OTA 无干扰性杂峰,结果准确可靠。
    赭曲霉毒素(ochratoxin A,OTA)是赭色曲霉属和几种青霉属真菌产生的有毒代谢产物。OTA 广泛地分布于发霉的谷物(如小麦、大麦、玉米)、豆类、奶酪、葡萄干等食品中,在世界各地均有存在。动物实验表明,OTA 具有较强的致癌活性和致畸作用,威胁到人类的健康[1]。目前世界上多个国家和地区均制订了OTA 的最大允许限量(maximumresidue limit,MRL)。我国粮食卫生标准中规定OTA在谷类、豆类中的MRL 为5 ng/g。
    测定OTA 的方法主要有高效液相色谱法(HPLC)、薄层色谱法(TLC)、气相色谱法(GC)和酶联免疫吸附法(ELISA)等。由于OTA 在样品中的量甚微,而共存干扰物质较多,因此在检测过程中,提取和净化是十分关键的步骤。目前一般采用有机溶剂或有机溶剂-水体系提取,净化的方式主要有液-液萃取及C18、中性氧化铝、弗罗里硅土(Florisil)固相萃取法等。随着生物化学技术的发展,国内外学者越来越多地采用免疫亲合柱(IAC)净化样品。中华人民共和国国家标准GB/T 23502-2009中对食品样品采用了IAC 净化方法。IAC 具有操作简便、专属性好、溶剂消耗少、净化效果好等特点。
    现有研究中采用高效液相色谱法检测OTA 时,多配备荧光检测器。目前还未见有采用高效液相色
谱-蒸发光散射(HPLC-ELSD)检测OTA 的报道,关于OTA 在中药中的分析研究也鲜有报道。本实验采用IAC 净化,建立HPLC-ELSD 分离测定中药中OTA 的新方法,为建立快速准确检测中药中OTA的方法提供参考。
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