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关键词：
莪术油,呋喃二烯,指纹图谱,相似度,高效液相色谱
发表时间：
2011-09-29 16:06:17
摘 要：目的 建立大鼠ig 炙甘草汤后体内甘草次酸的LC-MS/MS 测定方法。方法 采用醋酸乙酯沉淀蛋白处理血浆样品，选用白藜芦醇为内标，采用LC-MS/MS 法测定，色谱条件为ORBAX SB-C18 反相色谱柱（Agilent，50 mm×2.1 mm，1.8 μm），乙腈-水（80∶20，含0.2%甲酸）为流动相，体积流量0.2 mL/min，柱温30 ℃。样品经电喷雾离子（ESI）源负离子化后，通过Agilent 6410 三重四级杆串联质谱仪，采用多反应监测（MRM）对甘草次酸进行测定，分别选用m/z 469.4→425.4 和227.1→143.0 作为甘草次酸和内标物白藜芦醇的检测离子对。结果 甘草次酸在33.4～8 560.0 ng/mL 线性关系良好（R2＝0.997 1），日内（n＝6）、日间（n＝6）精密度、稳定性RSD 均小于10%。甘草次酸高、中、低3 个质量浓度平均提取回收率分别为75.3%、78.2%、78.5%。在此方法下得到大鼠ig 炙甘草汤后血浆中甘草次酸的药动学参数分别为tmax＝（8.00±1.13）h，Cmax＝（811.02±300.25）ng/mL，AUC0～24＝（11 439.21±3 367.36）ng/mL·h。结论 该方法灵敏、准确、快速、选择性高，可用于甘草次酸血药浓度监测和药动学研究。
炙甘草汤出自《伤寒论》，由炙甘草、生地黄、人参、阿胶、麦冬、大枣等9 味药材组成，是治疗“脉结代、心动悸”的经典名方。现代药理研究表明，炙甘草汤及其有效成分甘草酸、人参皂苷等能够明显拮抗各种化学和物理因素诱发的心律失常[1-3]，能够明显延迟心肌触发活动的发生、降低心肌细胞的自律性和兴奋性[4-6]。然而，迄今为止，国内外尚未见炙甘草汤活性成分的体内过程和药动学研究报道。有研究表明，甘草酸经肠道吸收后，受肠道菌群的影响，大部分以甘草次酸（glycyrrhetinic acid，GA）的形式进入血液[7]，甘草次酸的药理作用广泛[8]，本课题组前期利用LC-MS/MS 仅检测个别大鼠血浆中微量的甘草酸，不足以作为药动学研究指标。鉴于此，根据文献报道[9-10]，本实验采用LC-MS/MS法，建立了大鼠血浆中甘草次酸的测定方法，并对其进行了药动学研究，本方法灵敏度高，专属性强，为炙甘草汤的深入研究奠定了良好的基础。
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