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高效液相色谱法测定食品中硫酸软骨素

张艳琼 | -> | 1118| 8| 1231.929MB |食品,硫酸软骨素,软骨素酶ABC,高效液相色谱

张艳琼 张艳琼 | 文档量 |浏览量9799

摘 要:采用高效液相色谱法,通过检测被软骨素酶ABC酶解释放的2种不饱和双糖来测定食品中硫酸软骨素(ChS)。软骨素酶ABC水解ChS产生2种不饱和双糖(6-磺化和4磺化双糖),其在氨基相柱中保留时间分别为6.2和7.3 min。这些双糖产生的峰被用来确定样品中ChS的总量。此方法成功用于市售蛋黄酱、调味料和鱼肉肠的分析。
    硫酸软骨素(ChS)属于可被特定酶降解成不饱和双糖的杂多糖。几乎所有由软骨素酶ABC作用于4-硫酸软骨素(Ch4S)和6-硫酸软骨素(Ch6S)产生的双糖分别为2-乙酰氨基-2-脱氧-3-O-(β-D-葡-4-烯吡喃糖醛酸)-4-O-磺基-D-半乳糖(ΔDi-4S)和2-乙酰氨基-2-脱氧-3-O-(β-D-葡-4-烯吡喃糖醛酸)-6-O-磺基-D-半乳糖(ΔDi-6S)[1]。在日本,只有Ch4S和Ch6S作为乳化剂用于某些食品[2],允许使用标准通常是0.3 %~2 %。因此有必要检测食品中ChS含量以确保添加符合限制标准。
    目前测定食品中硫酸软骨素的方法是分光光度测定法[3],但此方法样品需较复杂的前处理,且有其他多糖干扰。
    一种由软骨素酶ABC酶解ChS异构体产生一定量的不饱和双糖的酶法被认为是检测ChS异构体的特效方法。在临床化学领域,用高效液相色谱法(HPLC)检测这些不饱和双糖[4-6]。
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