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关键词：
家兔,氯胺酮,尿液,GC-MS/MS
发表时间：
2012-03-09 14:36:50
摘 要 采用反相高效液相色谱法(HPLC) 切换波长法同时测定油菜中的内源激素赤霉素(GA 3)、32吲哚乙酸( IAA ) 和脱落酸(ABA ) , 以甲醇∶水∶乙腈(20∶60∶20) 为流动相, 结果显示其检出限分别为GA 3: 0. 08mgöL ; IAA: 0. 015mgöL ; ABA: 0. 025mgöL , 比单波长检测的检出限提高了4—10 倍; 相对标准偏差(RSD) 分别为GA 3: 6. 3% , IAA: 4. 34% ,ABA: 7. 95%。本实验采用切换波长法, 显著减低了各组分的检出限, 建立了一种以高灵敏度对多组分体系同时进行检测的方法。同时为快速、准确测定油菜内源激素提供了可靠方法。
植物激素在植物体内, 作为执行细胞通讯的化学信息在代谢、生长、形成等植物生理活动的各个方面均起着十分重要的作用[1, 2 ]。其主要生理功能是调节植物生长发育过程, 如细胞的分裂、增长等。了解植物激素的化学性质、作用机理和生理效应等, 既有助于深入了解植物的生长发育过程, 又可为外源激素在农业上的合理利用提供理论依据。但是内源激素在植物体内的含量很低, 一般为组织鲜重的10- 9—10- 7数量级, 按ngög 鲜重计IAA: 1—100, GA 3: 1—1000, 细胞分裂素(CTK) : 1—1000,ABA: 10—4000, 同时由于植物体组成复杂, 共存的干扰组分很多, 因而对植物激素的定量测定非常困难。
目前对植物激素测定的报道很多, 从张爱萍等(1994 年) 到史作安等(2004 年) 都报道了激素的测定方法, 如王若仲等(2002 年) “亚种间杂交稻内源激素的高效液相色谱法”采用反相液相色谱,254nm 检测波长, 外标法定量测出了三种激素GA 3、IAA 和ABA , 检出限分别为GA 3: 0. 5mgöL ,IAA: 0. 1mgöL ;ABA: 0. 03mgöL, 结果比较好; 谢君等(2001 年)“植物内源激素的反相高效液相色谱法测定”采用反相液相色谱, 254nm 检测波长, 测定了5 种内源激素的含量; 陈昆松等(2003 年)“HPLC 法检测果实组织中内源IAA、ABA 方法的改进”改变了激素的前处理后测定了果实的内源激素IAA 和ABA , 他们均采用单一波长分别进行检测[1—10 ]。植物中激素多组分同时存在, 单一波长并不能使每个组分都能够在最佳检测波长下检测。本实验以测定植物内源激素(GA 3、IAA、ABA ) 为例, 采用切换波长法对多组分样品进行了检测分析, 提高了检测灵敏度, 降低了检出限。本实验切变波长法解决了多组分检测时不能同时在高灵敏度下工作的难题, 为多组分同时检测降低检出限提供了可靠的方法。
目前对植物激素测定的报道很多, 从张爱萍等(1994 年) 到史作安等(2004 年) 都报道了激素的测定方法, 如王若仲等(2002 年) “亚种间杂交稻内源激素的高效液相色谱法”采用反相液相色谱,254nm 检测波长, 外标法定量测出了三种激素GA 3、IAA 和ABA , 检出限分别为GA 3: 0. 5mgöL ,IAA: 0. 1mgöL ;ABA: 0. 03mgöL, 结果比较好; 谢君等(2001 年)“植物内源激素的反相高效液相色谱法测定”采用反相液相色谱, 254nm 检测波长, 测定了5 种内源激素的含量; 陈昆松等(2003 年)“HPLC 法检测果实组织中内源IAA、ABA 方法的改进”改变了激素的前处理后测定了果实的内源激素IAA 和ABA , 他们均采用单一波长分别进行检测[1—10 ]。植物中激素多组分同时存在, 单一波长并不能使每个组分都能够在最佳检测波长下检测。本实验以测定植物内源激素(GA 3、IAA、ABA ) 为例, 采用切换波长法对多组分样品进行了检测分析, 提高了检测灵敏度, 降低了检出限。本实验切变波长法解决了多组分检测时不能同时在高灵敏度下工作的难题, 为多组分同时检测降低检出限提供了可靠的方法。
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