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LC-MS/MS法测定脑微透析液中乙酰胆碱的浓度

郝彩云 | -> | 680| 4| 394.607MB |乙酰胆碱,内标氘代乙酰胆碱-d9,液质联用

郝彩云 郝彩云 | 文档量 |浏览量11872

摘要 目的: 建立能够灵敏、特异、准确、可靠地测定脑微透析液中乙酰胆碱浓度的分析方法, 用于药物干预下脑神经递质变化的研究。方法: 建立乙酰胆碱液质联用检测方法, 条件是ES I( + )离子源, MRM 扫描检测离子对为乙酰胆碱m /z 146y87, 氘代乙酰胆碱- d9 (内标)m /z 155y 87。开展方法学考察, 以验证新建分析方法的准确性、精密度等, 在此基础上将该方法用于分析大鼠脑微透析手术后的实际样品, 以验证新建分析方法的适用性。结果: 乙酰胆碱浓度在01 0292 ~ 11 46 ng# mL- 1范围内线性良好( r= 019979), 检测限为01 00292 ng# mL- 1; 高、中、低浓度的准确度为9611% ~ 1111 7%; 日内精密度( n = 6)为118% ~ 718%, 日间精密度( n = 3) 为21 0% ~ 191 2%。结论: 应用LC - M S /M S技术建立不使用胆碱酯酶抑制剂测定大鼠脑微透析液中乙酰胆碱的方法迅速、灵敏、可靠。
    乙酰胆碱( acety lcho line, ACh)是一种经典的兴奋性神经递质, 通过结合特异受体, 在神经细胞之间或神经细胞与效应器细胞之间中起着信息传递作用。乙酰胆碱及其受体存在于从细菌到人类、从神经细胞到其他多种非神经细胞中, 提示它是一类与系统发生相关的古老分子, 可能不仅仅具有作为生理性递质的传递功能。
    多种人类疾病与乙酰胆碱及其受体相关[ 1] , 而脑中的乙酰胆碱尤为重要, 它是传导联络大脑神经元的一种主要物质, 是多重神经系统学习和记忆过程的重要神经递质。人体缺少乙酰胆碱则会加速脑细胞的衰老, 使记忆力显著下降, 甚至导致老年痴呆[ 2] 。
    液质联用技术在现代药物分析研究中发挥着越来越重要的作用。液相色谱是最常用的分离分析工具, 与质谱联用则可以更灵敏、特异、高效、快速地完成从分离到分析的一整套操作。作者将液质联用应用到不使用胆碱酯酶抑制剂检测脑微透析液中乙酰胆碱的浓度, 为展开在药物干预下脑神经递质变化的研究打下了坚实的基础。
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