不同基质传代白僵菌对桑天牛幼虫的侵染力与寄主血淋巴酚氧化酶活性的关系

徐沛涵 | -> | 738| 0| 188.683MB |白僵菌,桑天牛,侵染力,酚氧化酶活性

摘要: 以诱集自土壤中、对桑天牛Apriona germa ri 幼虫具有较高致病性的球孢白僵菌Beauveriaba ssiana Bb00为出发菌株R0, 经反复接种桑天牛幼虫分别获得菌株R1、R2、R3 和R4, 而通过反复在普通查氏培养基上传代分别获得菌株M 1、M2、M 3 和M 4。分别用R0、R2、R4 和M2、M 4 接种桑天牛幼虫, 发现在普通培养基上传代会导致菌株致病力降低, 而通过桑天牛幼虫传代培养可提高菌株的致病力。桑天牛幼虫感染白僵菌后, 其免疫互作使酚氧化酶活性先迅速上升, 随后因菌株的适应性增强而开始下降。用菌株M 2、M4 接种桑天牛幼虫后, 其血淋巴酚氧化酶活性比接种R2 和R4 的高。各菌株引起的桑天牛幼虫酚氧化酶活性出现高峰值的时间与其LT50值具有一定的相关性, 反映了各菌株不同的侵染速度; 同时各菌株引起的酚氧化酶活性高峰值也与其LC50值高度相关。说明桑天牛幼虫血淋巴中酚氧化酶活性与不同菌株对桑天牛幼虫的毒力具有一定的相关性, 同时酚氧化酶活性也可作为反映菌株毒力的一个重要参考指标。

桑天牛Apriona germa ri 是多种林木、果树、花卉的重要蛀干害虫, 也是我国危害最严重、最难防治的害虫之一。近年来, 其猖獗危害已成为我国养蚕业、林业及果树种植业等经济发展的严重障碍。白僵菌Beauveria ba ssiana 是重要的昆虫病原微生物, 笔者等[ 1] 从诱集自土壤中的9 株白僵菌中初步筛选出了对桑天牛幼虫具有较高致病性的B b00菌株, 发现该菌株多次在普通查氏培养基上传代后其致病力明显下降, 再经过多次重新接回到桑天牛幼虫虫体后其致病力又有所提高。这说明多次在寄主昆虫上传代后, 该菌株对寄主的适应性有可能逐渐增强, 从而使其致病力也逐渐提高。但有关这种现象的作用机制目前还未见报道。
病原真菌侵入昆虫体壁后主要在血腔中繁殖而使虫体僵硬死亡, 其成功侵染必须克服寄主血淋巴的免疫防御[ 2, 3] , 其中, 逃避寄主免疫识别是病菌成功侵染的重要途径[ 4 ~ 6 ] 。在昆虫免疫防御中, 酚氧化酶原激活系统起着关键作用, 如细胞免疫中包囊作用和结节形成过程常伴随着黑色素的沉积, 而黑色素的形成与血淋巴中酚氧化酶和底物的作用有关; 体液免疫过程中更会产生钝化或杀死入侵病原物的酚氧化酶。在昆虫体内, 酚氧化酶是以无活性的酚氧化酶原形式存在的, 这种无活性的酚氧化酶原只有在受到病原微生物产生的细胞壁成分如昆布多糖等的诱导激活后才能转化为有活性的酚氧化酶, 它们继而吸附于病原菌表面, 与底物作用后产生黑化并限制其入侵[ 7~ 11] 。因此菌株入侵寄主过程中酚氧化酶活力高低在一定程度上反映了它们逃避寄主免疫识别的能力。笔者研究了不同基质传代白僵菌菌株对桑天牛幼虫侵染力的变化与其侵染后寄主血淋巴酚氧化酶活力变化的关系, 以明确白僵菌是否通过多次桑天牛幼虫传代而获得逃避寄主免疫识别的能力从而增强了对桑天牛幼虫的致病力。

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