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双酚A人工抗原的光谱表征及免疫鉴定研究

谢湘琴 | -> | 802| 0| 0.214575MB |双酚A,人工抗原,光谱,免疫,鉴定

谢湘琴 谢湘琴 | 文档量 |浏览量19729

摘 要 双酚A(bisphenol A , BPA) 是一种酚类环境雌激素, 即使极低剂量残留对人类健康也有危害。为了建立其简单快速并适应现场检测的免疫分析方法, 必须先合成它的人工抗原并进行鉴定。通过对双酚A 进行结构修饰, 用碳二亚胺将结构修饰了的双酚A 与牛血清蛋白相偶联, 经透析得到纯的双酚A 人工抗原并冷冻干燥备用。然后用紫外光谱、红外光谱和免疫方法对人工抗原进行鉴定。结果表明, 合成的人工抗原紫外光谱图中具有蛋白质和双酚A 的特征吸收峰; 人工抗原红外光谱图中呈现双酚A 和牛血清蛋白的红外特征吸收峰; 通过竞争EL ISA 试验表明用合成的人工抗原免疫的Balb/ c 小鼠血清中产生了双酚A 的抗体。三种方法综合鉴定结果表明双酚A 人工抗原合成成功, 该人工抗原可以进一步用于制备抗双酚A 的单克隆抗体。
    双酚A(bisphenol A , BPA) 是一种酚类环境雌激素[1 , 2 ] ,又名2 ,22双(42羟基苯基) 丙烷、二苯酚基丙烷。双酚A 是重要的精细化工原料, 是生产聚碳酸酯、环氧树脂、聚砜以及
改性酚醛树脂等的重要中间体。
    双酚A 可通过食品包装容器和塑料薄膜渗入食品或饮料进入体内, 用于牙科的树脂和牙齿密封剂由BPA 或BPA2双甲基丙烯酸酯组成,能从牙体缓慢渗入唾液而进入体内。双酚A 还能诱导人类乳腺癌、前列腺癌的发生[3 , 4 ] 。BPA 也可以使雄鱼体内的卵黄蛋白原vitellogenin (VTG) 浓度显著提高, 抑制睾丸的生长及受精卵的发育[5 ] 。目前, 国内外检测BPA 的方法有紫外分光光度法、双波长分光光度法、气相色谱( GC) 法、气相色谱2质谱( GC/ MS) 法、高效液相色谱( HPLC) 法、高效液相色谱2紫外法( HPLC/ UV) 、液相色谱-质谱(LC/ MS) 法、反相液相色谱法、极谱法、荧光法、分子印记及EL ISA 法等[6-18 ] 。仪器方法检出限可达到μg ·L - 1 ,但样品前处理繁琐, 操作耗时, 也不适应现场测定。因此,建立简便、快速、准确并适应现场测定的免疫分析方法对检测双酚A 残留具有重要的意义。王兰[16 ] 等对双酚A 人工抗原合成进行了研究, 但鉴定方法过于简单。本研究用光谱和免疫方法对合成的双酚A 人工抗原进行综合鉴定, 期望为进一步建立双酚A 免疫分析方法提供基础, 也为其他小分子化合物的人工抗原合成与光谱鉴定提供参考。
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