0
关键词：
绿磺隆,克百威,三唑磷,多抗体免疫亲和色谱（MIAC）
发表时间：
2013-10-12 11:43:52
绿磺隆克百威三唑磷多抗体免疫亲和色谱技术研究
李文博 | -> | 507| 0| 0.364232MB |绿磺隆,克百威,三唑磷,多抗体免疫亲和色谱（MIAC）
摘要：采用碳酰二咪唑（CDI）将Sepharose CL-4B 活化并分别与纯化的抗绿磺隆、抗克百威、抗三唑磷的多克隆抗体共价偶联，合成相应的免疫亲和吸附剂，并制备了对绿磺隆、克百威和三唑磷具有特异性亲和力的多抗体免疫亲和色谱（MIAC）柱。对MIAC 的条件进行优化，选择0.02 mol·L-1 pH7.2 磷酸盐缓冲液作吸附与平衡介质，80%（体积分数）甲醇水溶液作洗脱剂。结果表明，在上述
试验条件下，MIAC 柱对绿磺隆、克百威和三唑磷的动态柱容量分别达1.81、2.29 和1.89 μg·mL-1 床体积。用MIAC 柱对添加有绿磺隆、克百威、三唑磷的河水与土壤提取液进行分离富集，洗脱液分别采用包被抗体直接竞争酶联免疫吸附（ELISA）法和高效液相色谱（HPLC）法测定，重复5 次，平均回收率是89.98%～106.2%，相对标准偏差（RSD）为3.21%～14.81%，ELISA 法和HPLC 法的测定结果基本一致。成功建立了绿磺隆、克百威和三唑磷的多抗体免疫亲和色谱分析技术并用于河水和土壤中绿磺隆、克百威、三唑磷残留的测定。
试验条件下，MIAC 柱对绿磺隆、克百威和三唑磷的动态柱容量分别达1.81、2.29 和1.89 μg·mL-1 床体积。用MIAC 柱对添加有绿磺隆、克百威、三唑磷的河水与土壤提取液进行分离富集，洗脱液分别采用包被抗体直接竞争酶联免疫吸附（ELISA）法和高效液相色谱（HPLC）法测定，重复5 次，平均回收率是89.98%～106.2%，相对标准偏差（RSD）为3.21%～14.81%，ELISA 法和HPLC 法的测定结果基本一致。成功建立了绿磺隆、克百威和三唑磷的多抗体免疫亲和色谱分析技术并用于河水和土壤中绿磺隆、克百威、三唑磷残留的测定。
近年来，由于大量使用农药而导致的农药残留问题已引起全世界的高度关注，农药残留分析新技术一直是各国研究的热点。农药残留分析包括单残留分析和多残留分析。农药多残留检测方法主要有气相色谱法（GC）[1-3]和高效液相色谱法（HPLC）[4-9]。应用这些方法需要对被测样品中的目标分析物进行提取、净化、浓缩等复杂的前处理。常规的样品前处理方法不仅费时费力，消耗大量的有机溶剂，还容易导致极微量的目标分析物丢失，影响分析结果的准确性和可靠性[10-11]，因此，需要开发简便高效快速的样品前处理新技术。免疫亲和色谱（immunoaffinity hromatography，IAC）利用抗原与抗体结合的专一性来实现样本提取液中的目标组分的分离与富集，具有选择性强、结合容量大、富集效率高、可重复应用等特点，大大地简化了样品的前处理过程，提高了分析方法的灵敏度和可靠性，在残留分析领域中处于越来越重要的地位[12-20]。
Ginkel[21]将IAC 分为三种类型：（1）一种抗体针对一种靶物质，即常规IAC，可用于单残留分析。（2）一种抗体针对多种靶物质（multi-analyte），即群选择性IAC，它将针对一组化合物共有结构的簇特异性抗体固定到一根柱子上，可用于样本中一类化合物的分离与富集。（3）多种抗体针对多种靶物质（multi-antibody，multi-analyte），即MIAC，它将多种抗体固定到一根柱子上，或将固定有不同抗体的不同柱子串联起来，可用于样本中不同种类化合物的分离与富集，从
而使MIAC 具备分离与富集同一样本中多种目标分析物的能力。
本研究制备了对绿磺隆、克百威和三唑磷具有特异性亲和力的MIAC 柱，并将其用于河水和土壤提取液中的这3 种农药的选择性分离与富集，建立了农药多类多残留分析的MIAC 技术，该项研究国内迄今尚未见报道。
Ginkel[21]将IAC 分为三种类型：（1）一种抗体针对一种靶物质，即常规IAC，可用于单残留分析。（2）一种抗体针对多种靶物质（multi-analyte），即群选择性IAC，它将针对一组化合物共有结构的簇特异性抗体固定到一根柱子上，可用于样本中一类化合物的分离与富集。（3）多种抗体针对多种靶物质（multi-antibody，multi-analyte），即MIAC，它将多种抗体固定到一根柱子上，或将固定有不同抗体的不同柱子串联起来，可用于样本中不同种类化合物的分离与富集，从
而使MIAC 具备分离与富集同一样本中多种目标分析物的能力。
本研究制备了对绿磺隆、克百威和三唑磷具有特异性亲和力的MIAC 柱，并将其用于河水和土壤提取液中的这3 种农药的选择性分离与富集，建立了农药多类多残留分析的MIAC 技术，该项研究国内迄今尚未见报道。
李文博发布的其他共享资料
-
-
关键词： 洛克沙胂,淋溶,迁移 发表时间： 2013-10-12 11:42:13
-
关键词： 二甲双胍,人血浆,液相色谱-串联质谱联用法,生物等效性 发表时间： 2013-07-08 09:57:17
-
关键词： 药用卤化丁基胶塞,质量状况,分析 发表时间： 2013-07-08 09:55:57
-
关键词： 药品,污染,微生物,溶血葡萄球菌,沃氏葡萄球菌,表皮葡萄球菌,基因测序,鉴定,溯源 发表时间： 2013-07-08 09:53:48
-
关键词： 药品检验学,药品,检验,学科 发表时间： 2013-07-08 09:52:14