麻疯树AFLP体系的建立与优化

郭天翔 | -> | 401| 0| 1.141821MB |AFLP,麻疯树,银染体系,DNA提取

郭天翔 郭天翔 | 文档量 |浏览量5043

摘 要 为了建立麻疯树AFLP (Amplified fragment length polymorphism)反应体系及筛选出扩增条带丰富的引物,以17份来自不同地方的麻疯树的幼嫩叶片为试材,对影响AFLP分析的关键因素包括DNA的提取质量和浓度、MseⅠ/ EcoRⅠ酶切反应时间和浓度、银染方法等进行了研究,从64对引物组合中筛选出适合麻疯树的引物. 结果表明,改良的CTAB方法提取的DNA质量比较好. 建立了一种适于麻疯树AFLP的优化体系:模板DNA的用量为400 ng,酶切反应时间为3 h,筛选出了8对适合麻疯树扩增条带多、多态性强的引物. 最终建立了适用于麻疯树的AFLP反应体系,并筛选出适合麻疯树的引物,为今后利用AFLP标记技术进行麻疯树的遗传多样性分析提供了标准化程序. 图5 表2 参15
    AFLP (Amplified fragment length polymorphism)标记是1992年由荷兰科学家Zabeau和Vos等在PCR和RFLP技术的基础上发展起来的一种DNA指纹分析技术,结合了RAPD标记多态性检测率高和RFLP标记稳定性好的优点. 此项技术对于基因组多态性检测不需要预先知道该基因组的序列特征,
易于标准化,检出的多态位点不仅能覆盖整个基因组,而且具有稳定性好、谱带丰富、DNA用样量少和灵敏度高等特点[1].AFLP一经产生后,便在树木的数量性状定位、种质资源鉴定、遗传连锁图谱构建、群体遗传结构及多样性研究、演化和亲缘关系研究等方面得到广泛的应用[2].
    麻疯树(Jatropha curcas L.)属于大戟科( Euphorbiaceae)麻疯树属(Jatropha),为落叶灌木或小乔木,原产于热带美洲,分布于热带亚热带地区,在热带地区以绿篱的方式被广泛栽培,其种子对人类和动物具有毒性. 麻疯树是一种抗旱耐瘠的多用途速生树种,是生产生物能源、生物农药的重要原料,也是干热河谷地区荒山造林的好树种. 麻疯树种子含油量高,种子油经过加工可生产柴油,其作为新型生物能源中的佼佼者,具有广泛的开发利用前景[3, 4]. 目前,尽管已经用SPAR[5]、ISSR[6~8]、RAPD[8~ 10]等技术对麻疯树的遗传多样性进行了研究,但仍存在一些问题,由于研究手段的局限性及居群材料的不同,造成对麻疯树遗传多样性的评价也不一致[5~9]. 因此,本研究利用AFLP技术对所收集的17份国内外麻疯树种质进行遗传多样性分析,以期建立起麻疯树AFLP体系的标准化程序及对麻疯树进行辅助育种.
郭天翔发布的其他共享资料
    0 色谱币 下载

麻疯树AFLP体系的建立与优化

(1141.821K)

所需色谱币: 0

您持有: $userGold色谱币,完成任务赚取色谱币

立即下载

友情链接(联系QQ:47140047)
关于我们  经营理念  业务合作  联系我们  法律声明  网站建议  网站导航  帮助中心
Copyright © 色谱世界 版权所有 鄂ICP备19022139号-2